Quins són els requisits de mostra per a la microscòpia de llum?
En el procés de preparació de la mostra del microscopi òptic, el gruix de la llesca de la mostra està entre 2 i 25um; el gruix de la llesca del microscopi electrònic es troba dins de 50-100 nm (excepte per al microscopi electrònic d'alta tensió, el gruix de la mostra pot arribar a 1 um), de manera que el mètode de tall utilitzat no és el mateix.
Pel que fa al portador, el portador de la secció del microscopi òptic és un portaobjectes de vidre i el portador de la secció del microscopi electrònic és la graella portadora.
Pel que fa a la fixació, les seccions de microscopi òptic es fixen amb un fixador compost, mentre que les seccions de microscopi electrònic es fixen repetidament amb un únic fixador.
Pel que fa a la tinció, la tinció de mostres òptiques és relativament senzilla. Segons les diferents mostres d'observació i el tipus de microscopi òptic, normalment n'hi ha prou amb utilitzar algunes taques fixes. Hi ha molts mètodes per tornar a tenyir mostres de microscopi electrònic i també són molt complicats, com ara la tinció negativa, la tinció de plata, etc.
Pel que fa a l'incrustació, la parafina, el col·lodió, la gelatina, etc. s'utilitzen com a agents d'incrustació per a seccions de microscopi òptic; La resina epoxi, la resina de poliestirè, la resina d'isobutilè i la resina soluble en aigua s'utilitzen com a agents d'incrustació per a seccions de microscopi electrònic.
Per tal que el camp de visió del microscopi rebi una il·luminació uniforme i suficient, cal ajustar el sistema de camí òptic d'il·luminació quan el microscopi s'instal·la i es depura per primera vegada. requisits. A més, agafar correctament l'ajust del sistema de camí òptic d'il·luminació és un pas necessari després de substituir la bombeta en el procés d'utilitzar el microscopi, i també és un mitjà necessari per provar el rendiment del microscopi de tant en tant al procés d'ús diari. L'ajust del sistema de camí òptic d'il·luminació del microscopi inclou principalment els 4 elements següents: 1. Ajust preliminar de la cambra de la llum de la font d'il·luminació fora del microscopi ① Primer, obriu la carcassa de la cambra de la làmpada i poseu la bombeta halògena a l'endoll prement el clip de molla. La brutícia, com ara les empremtes dactilars deixades a la bombeta, afectarà la vida útil de la bombeta. ②Coloqueu la sala de llums a la taula, després d'encendre l'alimentació, utilitzeu un tornavís especial per ajustar el forat de la perilla d'enfocament de la làmpada (marcat amb "←→"), de manera que el filament es projecti a la paret 1-2 m de distància i s'ajusta la imatge del filament. A continuació, ajusteu l'alçada del llum per ajustar el forat del filament (marcat amb "──") perquè la posició del filament sigui adequada; A continuació, ajusteu els forats del cargol d'ajust de la posició esquerra i dreta de la làmpada (marcats amb "──") per fer que la posició esquerra i dreta del filament sigui adequada.
2. L'objectiu de la inspecció i correcció de la posició de l'il·luminador de la font de llum (filament) al microscopi és ajustar l'extrem de la imatge de l'il·luminador al camp de visió de la lent de l'objectiu i garantir que el camp de visió del microscopi es rep de manera completa i uniforme des de la perspectiva de la font de llum. Il·luminació, que és un requisit previ per ajustar el sistema d'il·luminació Kühler. Eines bàsiques necessàries: Els telescopis de centratge estan equipats amb microscopi de compra. ① Desconnecteu la funda de vidre esmerilat de la casa de la làmpada i torneu a posar la casa de la làmpada al microscopi ② Seleccioneu una lent d'objectiu de 10 ×, engegueu el programa de font de llum per trobar la mostra i ajusteu el focus clarament i, a continuació, utilitzeu un objectiu de 40 × lent per enfocar la mostra clarament (objectiu 40× Es pot veure clarament la imatge sencera del filament); ③ Obriu el diafragma d'obertura i el diafragma de camp del condensador al màxim; ④ Desconnecteu un dels oculars, substituïu-lo per un telescopi centrador, agafeu la part blanca i esteneu l'ocular negre amb l'altra mà. La imatge del filament es pot veure al camp de visió; ⑤Si la posició del filament no és adequada, ajusteu el forat "──", ajusteu la imatge del filament en direcció horitzontal, ajusteu el forat "──" i ajusteu la imatge del filament en direcció vertical fins que ajusteu la imatge del filament a una circular. imatge que només omple l'obertura de la lent de l'objectiu; ⑥ Després de l'ajust, inseriu la funda de vidre esmerilat de nou a la seva posició original, desconnecteu el telescopi de centratge i substituïu l'ocular per al següent ajust. L'ajust esmentat anteriorment de la sala de llum de la font de llum d'il·luminació fora del microscopi i el calibratge de la posició de l'il·luminador de la font de llum dins del microscopi només s'han de dur a terme quan el microscopi s'instal·la i es depura per primera vegada i la bombeta està reemplaçat. En cas de confusió, podeu restaurar-lo a l'estat original segons els passos anteriors.
3. Ajust correcte del sistema d'il·luminació Kohler (Kohler) Ajust correcte del microscopi, una de les tasques principals és l'ajust del sistema d'il·luminació d'il·luminació, i la clau és l'ajust del sistema d'il·luminació Kohler. Per a tots els que utilitzen microscopis, especialment aquells que fan micrografies, haurien de tenir una certa comprensió i domini dels principis del sistema d'il·luminació Kühler i els seus passos d'ajust, de manera que puguin donar el màxim joc a les funcions del microscopi. Les fotos resultants poden ser més coherents i perfectes en efecte. El principi del sistema d'il·luminació Kühler és senzill: la llum emesa per qualsevol punt de l'il·luminador de la font de llum pot il·luminar el camp de visió del microscopi, i la llum emesa per cada punt de l'il·luminador de la font de llum es recull, i es troba en el camp de visió del microscopi. S'aconsegueix una il·luminació molt suficient i uniforme. L'objectiu d'ajustar el sistema d'il·luminació Kuhler és obtenir una il·luminació uniforme i suficient per al camp de visió observat i evitar que la llum dispersa afecti o interfereixi amb el sistema d'imatge, per evitar la formació de boira al negatiu durant la fotografia. Components essencials d'un sistema d'il·luminació Kühler d'alt ajust: diafragma de camp, sistema de condensador amb ajust en eix. ① Seleccioneu 10× objectiu objectiu i 10× ocular ② Col·loqueu la lent frontal del condensador al camí òptic, ajusteu el diafragma d'obertura a una posició moderada (ni massa gran ni massa petita) i, a continuació, aixequeu el condensador a la posició superior i ajusteu la placa giratòria del condensador a la posició de camp brillant "J" ③ Ajusteu el diafragma de camp al mínim (0,1)
④ Posa la mostra biològica segellada a l'escenari, encén la font de llum i enfoca clarament
⑤ Apareixerà una àrea il·luminada localment o un punt brillant al camp de visió, que és una imatge borrosa del diafragma de camp, en la qual es poden veure clarament els detalls de la mostra; Vegeu clarament els detalls de la mostra
⑥ Baixeu lleugerament el condensador, de manera que el punt brillant del camp de visió s'estreny gradualment i es converteixi gradualment en una imatge poligonal clara, que és la imatge clara del diafragma de camp;
⑦ En circumstàncies normals, la imatge poligonal no es troba al centre del camp de visió. Cal ajustar un parell de cargols centradors del condensador per ajustar la imatge poligonal del camp de visió a la posició central;
⑧ Obriu gradualment el diafragma del camp de visió per fer que la imatge poligonal es converteixi en un polígon inscrit del camp de visió i comproveu encara més la condició d'alineació. Si l'alineació no és ideal, continueu ajustant lleugerament el cargol d'alineació;
⑨ Obriu lleugerament el diafragma de camp per fer que la imatge poligonal desaparegui a la vora del camp de visió. En aquest punt, s'ha completat l'ajust del sistema d'il·luminació Kühler. Després d'ajustar el sistema d'il·luminació de Kühler, tot el camp de visió es va il·luminar de manera uniforme i les micrografies eren brillants i clares amb un contrast normal.
