Quines diferències hi ha entre la microscòpia de fluorescència i la microscòpia invertida
El microscopi és un instrument important en el cultiu cel·lular i experiments derivats relacionats. Actualment, hi ha diversos tipus de microscopis al mercat, i escollir un microscopi que s'ajusti a les necessitats i sigui adequat és un repte. A continuació, presentarem els principis dels microscopis invertits i els microscopis de fluorescència perquè tothom pugui triar.
El microscopi invertit, com un microscopi normal, consta principalment de tres parts: part mecànica, part d'il·luminació i part òptica.
La composició d'un microscopi invertit és la mateixa que la d'un microscopi vertical normal, excepte que la lent de l'objectiu i el sistema d'il·luminació estan invertits, amb el primer sota l'escenari i el segon per sobre de l'escenari.
Aquesta estructura amplia significativament la distància efectiva entre el sistema de focus d'il·luminació i l'escenari, facilitant la col·locació d'eines d'observació més gruixudes, com ara plats de cultiu i ampolles de cultiu cel·lular (per descomptat, també es poden utilitzar diapositives de vidre), mentre que la distància de treball entre el objectiu i el material no ha de ser molt gran.
El microscopi invertit és utilitzat per institucions mèdiques i sanitàries, universitats i instituts de recerca per observar microorganismes, cèl·lules, bacteris, cultius de teixits, suspensions, sediments, etc. Pot observar contínuament el procés de proliferació i divisió cel·lular i bacteriana en medi de cultiu, i pot capturar qualsevol forma d'aquest procés.
Àmpliament utilitzat en camps com la citologia, parasitologia, oncologia, immunologia, enginyeria genètica, microbiologia industrial i botànica.
La microscòpia de fluorescència s'utilitza per estudiar l'absorció, el transport, la distribució i la localització de substàncies dins de les cèl·lules.
Per a l'objecte provat, hi ha dues maneres de generar fluorescència: la fluorescència espontània, que s'emet directament per la irradiació ultraviolada; La fluorescència secundària es produeix quan l'objecte observat és tractat amb colorants fluorescents i exposat a llum ultraviolada abans d'emetre fluorescència.
Algunes substàncies de les cèl·lules, com la clorofil·la, produeixen fluorescència espontània després d'estar exposades a la radiació ultraviolada; Algunes substàncies en si mateixes poden no emetre fluorescència, però si es tenyeixen amb colorants fluorescents o anticossos fluorescents, també poden emetre fluorescència secundària sota radiació ultraviolada.
Un microscopi de fluorescència utilitza una font de llum puntual d'alta eficiència lluminosa per emetre una certa longitud d'ona de llum (UV 365nm o UV blau 420nm) a través d'un sistema de filtrat de color com a llum d'excitació, que excita les substàncies fluorescents de la mostra per emetre diversos colors de fluorescència. Després d'això, s'observa mitjançant la ampliació de la lent de l'objectiu i l'ocular.
D'aquesta manera, fins i tot amb una fluorescència feble, és fàcilment reconeixible i altament sensible sota fons forts contrastats. S'utilitza principalment per estudiar l'estructura cel·lular, la funció i la composició química.
