Dos enfocaments d'observació comunament aplicats per a microscopis
1, Observació del camp fosc
El camp de visió fosc és en realitat il·luminació de camp fosc. Les seves característiques són diferents del camp de visió brillant, ja que no observa directament la llum il·luminadora, sinó que observa la llum reflectida o difractada de l'objecte que s'inspecciona. Per tant, el camp de visió es converteix en un fons fosc, mentre que l'objecte que s'inspecciona presenta una imatge brillant.
El principi del camp fosc es basa en el fenomen òptic Tyndall, on les partícules de pols no poden ser observades per l'ull humà quan s'exposen a una llum forta a causa de la difracció causada per la llum forta. Si la llum es projecta obliquament sobre ell, les partícules semblen augmentar de volum a causa de la reflexió de la llum, fent-les visibles a l'ull humà.
L'accessori especial necessari per a l'observació de camp fosc és un focus de camp fosc. La seva característica és que no permet que el feix de llum passi a través de l'objecte de baix a dalt, sinó que canvia la trajectòria de la llum per dirigir-se obliquament cap a l'objecte, de manera que la llum d'il·luminació no entri directament a la lent de l'objectiu, i utilitza la imatge brillant formada per la reflexió o la difracció de la llum de la superfície d'observació és molt més gran que la llum fosca a la superfície d'observació. observació de camp, arribant fins a 0,02-0,004
2, mètode d'inspecció de mirall de contrast de fase
L'èxit de la invenció de la microscòpia de contrast de fase en el desenvolupament de microscopis òptics és un assoliment important en la tecnologia de microscòpia moderna. Sabem que l'ull humà només pot distingir la longitud d'ona (color) i l'amplitud (brillantor) de les ones de llum. Per a exemplars biològics incolors i transparents, quan la llum passa a través, la longitud d'ona i l'amplitud no canvien gaire, cosa que dificulta l'observació de l'exemplar en un camp brillant.
El microscopi de contrast de fase utilitza la diferència de longitud del camí òptic de l'objecte que s'inspecciona per a la inspecció del mirall, utilitzant eficaçment el fenomen d'interferència de la llum per transformar la diferència de fase que l'ull humà no pot distingir en una diferència d'amplitud distingible. Fins i tot les substàncies incolores i transparents poden esdevenir clarament visibles Això facilita molt l'observació de cèl·lules vives, per tant, la microscòpia de contrast de fase s'utilitza àmpliament en microscopis invertits.
El principi bàsic de la microscòpia de contrast de fase és convertir la diferència del camí òptic de la llum visible que travessa l'espècimen en diferència d'amplitud, millorant així el contrast entre diverses estructures i fent-les clares i visibles. Després de passar per l'exemplar, la llum experimenta una refracció, desviant-se del camí òptic original i retardant-se 1/4 λ (longitud d'ona). Si la diferència del camí òptic augmenta o disminueix en un altre 1/4 λ, la diferència del camí òptic es converteix en 1/2 λ, i la interferència entre els dos feixos de llum augmenta o disminueix després de combinar l'eix, millorant el contrast En termes d'estructura, els microscopis de contrast de fase tenen dues diferències especials amb els microscopis òptics ordinaris:
1. Entre la font de llum i el condensador es troba un diafragma anular, i la seva funció és formar un con de llum buit que travessa el condensador i s'enfoca a la mostra.
2. Placa de fase angular: s'afegeix una placa de fase recoberta de fluorur de magnesi a la lent de l'objectiu, que pot retardar la fase de llum directa o difractada en 1/4 λ. Es pot dividir en dos tipus:
(1). Placa de fase A+: retarda la llum directa 1/4 λ i afegeix els dos conjunts d'ones de llum després de combinar els eixos. L'amplitud augmenta i l'estructura de la mostra es torna més brillant que el medi circumdant, formant un contrast brillant (o contrast negatiu)
(2). Placa de fase B+: retarda la llum difractada en 1/4 λ i resta les ones de llum després de combinar els eixos de dos conjunts de raigs de llum, donant lloc a una disminució de l'amplitud i formant un contrast fosc (o contrast positiu). L'estructura es torna més fosca que el medi circumdant
