Alguns paràmetres tècnics del microscopi òptic
L'obertura numèrica, abreujada com a NA, és un paràmetre tècnic clau per a lents objectius i condensadors. Serveix com a indicador important per avaluar el seu rendiment, especialment per a lents objectius. El seu valor està marcat a la carcassa exterior de la lent de l'objectiu i del condensador respectivament.
L'obertura numèrica (NA) es defineix com el producte de l'índex de refracció (n) del medi entre la lent frontal de l'objectiu i la mostra, i el sinus de la meitat de l'angle d'obertura (u). S'expressa amb la fórmula: NA=n*sin(u/2)
L'angle d'obertura, també conegut com a obertura angular, és l'angle format entre un punt d'objecte a l'eix òptic de l'objectiu i el diàmetre efectiu de la lent frontal de l'objectiu. Un angle d'obertura més gran permet que entri més llum a l'objectiu. És proporcional al diàmetre efectiu de l'objectiu i inversament proporcional a la distància focal.
2. Resolució
La resolució d'un microscopi fa referència a la distància mínima entre dos punts d'objecte que el microscopi pot distingir clarament, també anomenada poder de resolució. La seva fórmula de càlcul és: σ=λ / NA
on σ és la distància mínima resoluble; λ és la longitud d'ona de la llum; NA és l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu. Es pot veure que la resolució d'un microscopi ve determinada per la NA de l'objectiu i la longitud d'ona de la llum d'il·luminació. Com més gran sigui el NA i més curta sigui la longitud d'ona d'il·luminació, menor serà el valor de σ i més alta serà la resolució.
3. Ampliació i Ampliació útil
Com que l'augment s'aconsegueix dues vegades amb la lent objectiu i l'ocular, l'augment total Γ del microscopi és el producte de l'augment de l'objectiu i l'augment de l'ocular Γ₁: Γ=*Γ₁
Òbviament, en comparació amb una lupa, un microscopi pot aconseguir un augment molt més elevat. L'ampliació es pot ajustar fàcilment canviant les lents d'objectiu i els oculars amb diferents augments.
L'ampliació també és un paràmetre important del microscopi, però una ampliació més alta no sempre és millor. El límit de l'ampliació del microscopi es defineix com l'ampliació útil.
4. Profunditat de focus
La profunditat de focus és l'abreviatura de la profunditat focal. En enfocar un objecte amb un microscopi, no només es poden veure clarament els punts del pla enfocat, sinó que també es manté nítid un cert rang de gruix per sobre i per sota d'aquest pla. El gruix d'aquesta zona clara és la profunditat del focus. Una gran profunditat d'enfocament permet l'observació de tota la capa de l'exemplar, mentre que una petita profunditat d'enfocament només permet l'observació d'una porció fina de l'exemplar. La profunditat d'enfocament té les següents relacions amb altres paràmetres: (1) La profunditat d'enfocament és inversament proporcional a l'augment total i l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu. (2) Una major profunditat d'enfocament correspon a una resolució més baixa.
Els objectius de poca ampliació generalment tenen una gran profunditat d'enfocament, la qual cosa comporta dificultats per a la fotomicrografia. Això es descriu amb detall a l'apartat de fotomicrografia.
