Principis i característiques estructurals de la microscòpia de fluorescència

Jan 05, 2024

Deixa un missatge

Principis i característiques estructurals de la microscòpia de fluorescència

 

El microscopi de fluorescència és l'ús d'una alta eficiència lluminosa de la font de llum puntual, mitjançant el sistema de filtrat de color per emetre una certa longitud d'ona de llum (com ara ultraviolada 3650 o blau violeta 4200) com a llum d'excitació, l'excitació de material fluorescent dins l'espècimen emet una varietat de diferents colors de fluorescència, i després es magnifica a través de l'objectiu i els oculars per a l'observació. D'aquesta manera, en el fons de contrast fort, fins i tot si la fluorescència és molt feble, és fàcil d'identificar, alta sensibilitat, s'utilitza principalment per a l'estudi de l'estructura i la funció cel·lular i la composició química. L'estructura bàsica d'un microscopi de fluorescència es compon d'un microscopi òptic ordinari més alguns accessoris (com ara una font de llum de fluorescència, filtres d'excitació, separador de feix bicolor i filtres de bloqueig, etc.). Font de llum fluorescent: generalment s'utilitza làmpada de mercuri d'ultraalta pressió (50-200W), que pot emetre una varietat de longituds d'ona de llum, però cada material fluorescent té una longitud d'ona d'excitació de fluorescència més forta, de manera que cal afegir filtres d'excitació (generalment). filtre d'excitació ultraviolada, violeta, blau i verd), de manera que només una certa longitud d'ona de la llum d'excitació a través de la irradiació de mostres, mentre que l'altra llum s'absorbeix. Per tant, cal afegir un filtre d'excitació (generalment filtres d'excitació ultraviolat, violeta, blau i verd), de manera que només una certa longitud d'ona de llum d'excitació a través de l'exemplar, mentre que una altra llum s'absorbeix. Quan cada substància s'irradia amb llum d'excitació, emet una fluorescència visible d'una longitud d'ona més gran que la de la llum irradiada en molt poc temps. La fluorescència té una especificitat, generalment més feble que la llum d'excitació, per poder observar la fluorescència específica, en la lent objectiu darrere de la necessitat d'afegir un filtre de bloqueig (o supressió).


El seu paper és doble:
Un és absorbir i bloquejar la llum d'excitació a l'ocular, per no alterar la fluorescència i el dany ocular.


El segon és seleccionar i deixar passar la fluorescència específica, mostrant un color fluorescent específic. Els dos tipus de filtres s'han de seleccionar i utilitzar conjuntament.

 

1digital microscope

Enviar la consulta