Introducció als avantatges i desavantatges del microscopi d'exploració làser multifotòn
Avantatges de la microscòpia d'escaneig làser multifotòn:
1. Emocionat per la llum vermella o la llum infraroja, la dispersió de la llum és petita i la dispersió de petites partícules és inversament proporcional a la quarta potència de la longitud d'ona.
2. Es poden recollir més fotons dispersos de la secció d'imatge sense forats.
3. El forat no pot distingir els fotons dispersos emesos des de l'àrea desenfocada o de l'àrea d'enfocament, i la relació senyal-soroll de la imatge multifotònica en capes profundes és bona.
4. La llum ultraviolada o visible utilitzada per a l'excitació d'un sol fotó és fàcilment absorbida i atenuada per la mostra abans que el feix arribi al pla focal, i no és fàcil excitar capes profundes.
5. Pel que fa a l'observació al microscopi biològic, la primera consideració és no danyar l'estat actiu del propi organisme i mantenir la circulació d'aigua, concentració d'ions, oxigen i nutrients. En el cas de l'observació de la llum, tant la calor com l'energia fotogràfica s'han de mantenir dins de la quantitat d'irradiació i l'energia lluminosa que no danyarà les cèl·lules.
6. La microscòpia multifotònica té molts avantatges. Com ara la resolució tridimensional, la penetració profunda, l'eficiència de dispersió, la llum de fons, la relació senyal-soroll, el control, etc., tenen característiques que els microscopis làser anteriors no tenien o no podien superar.
Desavantatges de la microscòpia d'escaneig làser multifotòn:
1. Només per a imatges de fluorescència.
2. Si la mostra inclou cromòfors que absorbeixen la llum d'excitació, la mostra pot estar danyada tèrmicament.
3. La resolució es redueix lleugerament. Encara que es pot millorar utilitzant l'obertura confocal al mateix temps, el senyal es perd.
4. A causa de la limitació dels làsers ultraràpids cars, el cost del microscopi d'escaneig multifotòn és relativament elevat.
