Com triar un microscopi de fluorescència adequat
El microscopi de fluorescència és un equip d'imatge microscòpica estàndard als departaments de laboratoris i patologia, que utilitza característiques de fluorescència per a l'observació i la imatge. S’utilitza àmpliament en diversos camps com la biologia cel·lular, la neurobiologia, la botànica, la microbiologia, la patologia, la genètica, etc. La imatge de fluorescència té els avantatges de l’alta sensibilitat i l’especificitat, fent -la molt adequada per observar la distribució de proteïnes específiques, orgànuls, etc. En teixits i cèl·lules, estudiant localització de la CO, seguiment de processos dinàmics com ara canvis en la concentració d’Inion, i tan sols.
Selecció de font de llum fluorescent
Les fonts de llum fluorescents utilitzades habitualment inclouen actualment làmpades de mercuri, làmpades d’halogenes metàl·liques i les fonts de llum LED que es desenvolupen ràpidament en els darrers anys. L’espectre de fonts de llum fluorescents pot ser continu o discontinu i l’energia varia en diferents bandes. Les fonts de llum LED s’estan convertint gradualment en la principal font de llum dels microscopis de fluorescència a causa de les seves bandes espectrals relativament estretes, una producció d’energia més estable, una vida útil més llarga i una major seguretat i una amabilitat ambiental.
Microscopi confocal
En l'observació de la microscòpia de fluorescència tradicional, a causa del solapament de substàncies d'etiquetatge fluorescents i estructures de fluorescència espontània, estan estretament unides. No obstant això, els objectius de microscòpia d’epifluorescència tradicionals no només recullen llum del pla focal, sinó que també recullen llum dispersa per sobre i per sota del pla focal, donant lloc a una resolució i contrast d’imatges molt reduïdes.
La imatge confocal només detecta la part de la llum reflectida des del pla focal, resolent així el problema anterior. La font de llum forma un punt petit i fi en el pla focal a través d’un forat, i la llum emesa des del pla focal es recopila per la lent objectiva. La majoria de la fluorescència emesa des de punts superiors o per sota del pla focal de la lent objectiva no pot convergir al forat. Només la fluorescència situada al pla focal i una petita porció de fluorescència defocada pot passar pel forat, mentre que el feix de llum fora del pla focal convergeix al davant o darrere de la placa del forat i es bloqueja d’entrar al detector a través del forat. La imatge detectada és la imatge del pla focal, de manera que es millora molt la qualitat de la imatge final.
A causa dels diversos avantatges i pràctica de la microscòpia confocal d’escaneig làser, la microscòpia confocal és actualment un assistent experimental indispensable en els camps d’alta precisió de la biologia cel·lular, la botànica i la investigació cel·lular. Al mateix temps, en futurs centres de recerca científica, serà l’eina de recerca més fonamental i bàsica.
