Com ajustar la intensitat del làser d'un microscopi confocal d'escaneig làser
① Perilla de control de potència: generalment s'estableix al 30% del valor màxim. Una sortida més alta escurça la vida útil del làser i introdueix soroll làser. Optimitzeu la intensitat ajustant primer AOTF, PMT i altres components.
② Filtre Acousto-Optic Tunable (AOTF): controla el feix de llum d'excitació i la intensitat. Pot encendre o apagar el làser en mil·lisegons o ajustar la intensitat del làser contínuament del 0 al 100%. Això permet aplicar diferents raigs làser i valors d'intensitat seleccionats a cada píxel de la imatge.
Principi de funcionament: es basa en la difracció de Bragg de la llum incident induïda per les ones acústiques que es propaguen al medi. Quan s'introdueix un senyal de RF d'una freqüència específica, l'AOTF difracta la llum policromàtica incident i selecciona llum monocromàtica de longitud d'ona λ. Hi ha una correspondència un a un entre la longitud d'ona de la llum monocromàtica seleccionada i la radiofreqüència f. La longitud d'ona de sortida es pot canviar de manera ràpida i aleatòria simplement ajustant el senyal elèctric. L'AOTF permet un ajust continu de la intensitat del làser amb una resposta ràpida per a l'estimulació local, l'escaneig i el canvi ràpid de longitud d'ona a nivell de microsegons.
En un microscopi confocal d'escaneig làser, el tub fotomultiplicador (PMT) no pot augmentar la intensitat del làser, però ajusta la intensitat del senyal fotoelèctric per a la imatge final. Per tant, ajustar la tensió del tub fotomultiplicador canvia la brillantor de la imatge. A més, la mida del forat confocal afecta el recompte de fotons i també es pot utilitzar per ajustar la brillantor de la imatge. El tub fotomultiplicador és un tub especial de buit extremadament sensible a la llum ultraviolada, visible i infraroja propera. Amplifica els senyals òptics entrants febles fins a 10⁸ vegades perquè es puguin mesurar els senyals de llum.
