Com es diferencia la microscòpia de fluorescència de la microscòpia confocal làser
Microscopi de fluorescència
1, el microscopi de fluorescència és utilitzar llum ultraviolada com a font de llum, que s'utilitza per irradiar l'objecte a examinar, de manera que emeti fluorescència i, a continuació, observeu la forma de l'objecte i la seva ubicació sota el microscopi. El microscopi de fluorescència s'utilitza per estudiar l'absorció, el transport, la distribució i la localització de substàncies químiques a les cèl·lules. Algunes substàncies de la cèl·lula, com la clorofil·la, poden emetre fluorescència després de la irradiació per llum ultraviolada; Hi ha algunes substàncies que no poden fluorescència per si soles, però si es tenyeixen amb colorants fluorescents o anticossos fluorescents, també poden emetre fluorescència després de la irradiació per llum ultraviolada, i la microscòpia de fluorescència és una de les eines per a la investigació qualitativa i quantitativa d'aquest tipus de substàncies.
2, principi del microscopi de fluorescència:
(A) Font de llum: la font de llum irradia diverses longituds d'ona de llum (de l'ultraviolat a l'infraroig).
(B) font del filtre d'excitació: a través de l'exemplar es pot produir fluorescència d'una longitud d'ona específica de la llum, alhora que bloqueja l'excitació de la llum inútil de fluorescència.
(C) Espècimen fluorescent: generalment tenyit amb un fluorocrom.
(D) Filtres de bloqueig: bloquegen la llum d'excitació que no és absorbida per la mostra per transmetre selectivament la fluorescència, i algunes longituds d'ona de la fluorescència també es transmeten selectivament. Un microscopi que utilitza llum ultraviolada com a font de llum per fer fluoresc l'objecte irradiat. El microscopi electrònic es va muntar per primera vegada l'any 1931 a Berlín, Alemanya, per Knorr i Haroska. Aquest microscopi utilitza un feix d'electrons d'alta velocitat en lloc d'un feix de llum. Com que la longitud d'ona del corrent d'electrons és molt més curta que l'ona lluminosa, l'ampliació del microscopi electrònic pot ser fins a 800,000 vegades, la resolució del límit mínim de 0,2 nanòmetres . 1963 va començar a utilitzar el microscopi electrònic d'escaneig es pot veure a la superfície de la petita estructura de l'objecte.
3, l'àmbit d'aplicació: s'utilitza per ampliar la imatge d'objectes petits. S'utilitza generalment en biologia, medicina, partícules microscòpiques i altres observacions.
Microscopi confocal
1, microscopi confocal a la llum reflectida a la carretera més una mitja lent reflectant, haurà passat a través de la lent de la llum reflectida plegada en altres direccions, en el seu focus en un deflector amb un forat, el forat es troba a el focus, darrere del deflector hi ha un tub fotomultiplicador. Es pot imaginar que la llum reflectida abans i després del punt focal de la llum del detector a través d'aquest conjunt de sistema confocal, no es podrà enfocar en el petit forat, serà bloquejada pel deflector. Així, el fotòmetre mesura la intensitat de la llum reflectida en el punt focal.
2, principi: el microscopi òptic tradicional utilitza una font de llum de camp, la imatge de cada punt de l'exemplar es veurà interferida per la difracció o la dispersió de la llum dels punts veïns; El microscopi confocal d'escaneig làser utilitza un raig làser a través del forat il·luminador per formar una font de llum puntual a la mostra en el pla focal de l'escaneig de cada punt de la mostra, l'exemplar s'irradia, en la detecció del forat a la imatge. , mitjançant la detecció del forat després del tub fotomultiplicador (PMT) o del dispositiu d'electroacoblament en fred (cCCD) punt per punt o punt per punt o punt per punt, la intensitat de la llum es mesura amb un fotòmetre. cCCD) rep punt per punt o línia per línia i forma ràpidament una imatge fluorescent a la pantalla del monitor de l'ordinador. El forat d'il·luminació i el forat de detecció en relació amb el pla focal de la lent de l'objectiu es conjuguen, el punt del pla focal es centra alhora en el forat d'il·luminació i el forat d'emissió, el punt fora del pla focal no estarà al forat de detecció a la imatge, de manera que la imatge confocal és l'exemplar de la secció transversal òptica, superant les deficiències de les imatges borroses dels microscopis normals.
3, Camps d'aplicació: medicina, investigació animal i vegetal, bioquímica, bacteriologia, biologia cel·lular, embriologia de teixits, ciència dels aliments, genètica, farmacologia, fisiologia, òptica, patologia, botànica, neurociència, biologia marina, ciència dels materials, ciència electrònica, mecànica, geologia del petroli, mineralogia.
