Classificació dels objectius del microscopi òptic
1. Classificació de les lents objectives:
La lent objectiu es pot dividir en lent objectiu seca i lent objectiu d'immersió líquida segons les diferents condicions d'ús; entre ells, la lent d'objectiu d'immersió líquida es pot dividir en lent d'objectiu d'immersió en aigua i lent d'objectiu d'immersió en oli (l'augment que s'utilitza habitualment és de 90-100 vegades).
Segons els diferents augments, es pot dividir en objectiu de baix augment (menys de 10 vegades), objectiu d'augment mitjà (unes 20 vegades) i objectiu d'augment d'alt (40-65 vegades).
Segons la situació de correcció de l'aberració, es divideix en lent objectiu acromàtic (comunament utilitzat, la lent objectiu que pot corregir l'aberració cromàtica de dos tipus de llum de color en l'espectre) i lent objectiu apocromàtic (la lent objectiu que pot corregir la lent cromàtica). aberració de tres tipus de llum de color en l'espectre, que és car i s'utilitza poc).
2. Els principals paràmetres de la lent objectiu:
Els principals paràmetres de la lent objectiu inclouen: augment, obertura numèrica i distància de treball.
① L'ampliació es refereix a la relació entre la mida de la imatge vista pels ulls i la mida de l'exemplar corresponent. Es refereix a la relació de longituds en lloc de la relació d'àrees. Exemple: el factor d'ampliació és 100×, que fa referència a una mostra amb una longitud d'1 μm. La longitud de la imatge ampliada és de 100 μm. Si es calcula per àrea, s'amplia 10,000 vegades.
L'augment total del microscopi és igual al producte dels augments de l'objectiu i de l'ocular.
②. L'obertura numèrica també s'anomena proporció d'obertura, abreujada com a NA o A. És el paràmetre principal de la lent objectiu i del condensador, i és directament proporcional a la resolució del microscopi. Els objectius secs tenen una obertura numèrica de 0.05-0,95 i els objectius d'immersió en oli (oli de cedre) tenen una obertura numèrica d'1,25.
③. La distància de treball es refereix a la distància des de la part inferior de la lent frontal de la lent de l'objectiu fins a la part superior de la coberta de vidre de la mostra quan la mostra observada és la més clara. La distància de treball de la lent de l'objectiu està relacionada amb la distància focal de la lent de l'objectiu. Com més llarga sigui la distància focal de la lent de l'objectiu, menor serà l'ampliació i més gran serà la distància de treball. Exemple: l'objectiu 10x està marcat amb 10/0,25 i 160/{0,17, on 10 és l'ampliació de la lent de l'objectiu; 0,25 és l'obertura numèrica; 160 és la longitud del canó de la lent (en mm); 0,17 és el gruix estàndard del vidre de coberta (en mm)). La distància efectiva de treball de la lent objectiu 10x és de 6,5 mm i la distància efectiva de treball de la lent objectiu 40x és de 0,48 mm.
3. La funció de la lent objectiu és augmentar la mostra per primera vegada, i és la part més important la que determina el rendiment del microscopi: la resolució.
La resolució també s'anomena resolució o poder de resolució. La mida de la resolució s'expressa pel valor de la distància de resolució (la distància mínima entre dos punts d'objecte que es poden resoldre). A la distància fotòpica (25 cm), els ulls humans normals poden veure clarament dos punts d'objecte que es troben entre 0.073 mm. El valor de 0,073 mm és la distància de resolució dels ulls humans normals. Com més petita sigui la distància de resolució del microscopi, més gran serà la resolució i millor serà el rendiment.
La mida de la resolució del microscopi està determinada per la resolució de la lent de l'objectiu, i la resolució de la lent de l'objectiu està determinada per la seva obertura numèrica i la longitud d'ona de la llum d'il·luminació.
Quan s'utilitza el mètode d'il·luminació central comú (el mètode d'il·luminació fotòpica que permet que la llum passi a través de la mostra de manera uniforme), la distància de resolució del microscopi és d=0,61λ/NA
A la fórmula, d——la distància de resolució de la lent objectiu, en nm.
λ: longitud d'ona de la llum d'il·luminació, unitat nm.
NA - l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu
Per exemple, l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu d'immersió en oli és 1,25 i el rang de longitud d'ona de la llum visible és de 400-700 nm. Si la longitud d'ona mitjana és de 550 nm, aleshores d=270 nm, que és aproximadament la meitat de la longitud d'ona de la llum d'il·luminació. En general, el límit de resolució dels microscopis il·luminats amb llum visible és de 0,2 μm.
