Aplicacions del microscopi confocal d'escaneig làser en biologia
① És aplicable a gairebé tots els camps de recerca cel·lular, incloses la biologia cel·lular, la fisiologia cel·lular, la neurobiologia i la neurofisiologia.
② Permet l'observació i l'anàlisi en temps real no invasives de cèl·lules vives per a la investigació morfològica i funcional combinada. La detecció cel·lular és no invasiva, segura, fiable i altament repetible. Les dades i les imatges es poden emetre ràpidament o emmagatzemar-les per a una conservació a llarg termini.
③ L'exploració contínua de la secció òptica es pot realitzar en cèl·lules vives, teixits o rodanxes de teixit cel·lular per obtenir estructures fines de capes 2D i 3D d'una sola cèl·lula, grups cel·lulars o teixits locals observats. Aquests inclouen estructures específiques de cèl·lules com ara citoesquelets, cromosomes, orgànuls, sistemes de membrana cel·lular i estructures profundes d'exemplars, així com imatges tridimensionals completes. Les imatges en quatre dimensions es poden adquirir analitzant els canvis al llarg del temps. També es poden obtenir imatges que varien amb la longitud d'ona de fluorescència per realitzar imatges multidimensionals. Permet la localització espacial d'alta precisió de cèl·lules de teixit i altres estructures diana, donant suport a l'observació, l'anàlisi i el registre dinàmics en temps real per a l'anàlisi qualitativa, quantitativa, resolta en el temps i de distribució posicional.
④ Observació de biomaterials cel·lulars en cèl·lules vives o mostres en rodanxes etiquetades amb sondes fluorescents, inclòs l'etiquetatge de membrana, el traçat cel·lular, les substàncies diana, les reaccions bioquímiques, els receptors o lligands, els àcids nucleics, etc. Es poden etiquetar i observar múltiples substàncies simultàniament en la mateixa mostra.
⑤ Etiquetatge fluorescent d'ions intracel·lulars amb etiquetes simples o múltiples. Detecta la proporció i els canvis dinàmics de les concentracions d'ions intracel·lulars com ara pH, sodi, potassi, calci i magnesi.
⑥ Mesura del potencial de la membrana cel·lular, detecció de radicals lliures, etc.
⑦ Realitzeu experiments FRAP (Recuperació de fluorescència després del fotoblanqueig) d'alta precisió. Combinat amb la pèrdua de fluorescència en experiments de fotoblanqueig, s'utilitza per estudiar la comunicació cèl·lula-cèl·lula i el moviment de molècules intracel·lulars. En els experiments d'escaneig temporal i fotoblanqueig (fotodestrucció), les dades i les imatges de cada canal es poden produir i convertir de manera sincrònica. Es poden realitzar experiments FRET (Förster Resonance Energy Transfer) per estudiar el moviment i la interacció de molècules i ions intracel·lulars mitjançant canvis en la longitud d'ona de fluorescència.
⑧ Disposa d'alta precisió (localització espacial, quantificació, resolució de longitud d'ona, resolució de temps), alta sensibilitat i resposta ràpida. Pot separar, observar i analitzar teixits cel·lulars marcats amb multifluorescència en la mateixa finestra de temps, fins i tot per a múltiples fluoròfors amb longituds d'ona d'emissió molt properes (només una diferència de diversos nanòmetres). També ofereix funcions de mesura i anàlisi en línia, com ara l'anàlisi de co-localització per a etiquetes multifluorescència.
