Ajust del sistema de recorregut òptic d'imatge del microscopi lleuger i esquema de l'examen microscòpic

Ajust del sistema de recorregut òptic d'imatge del microscopi lleuger i esquema de l'examen microscòpic

Ajust del sistema de recorregut òptic d'imatge i esquema d'examen microscòpic

L'ajust del sistema òptic d'imatge d'un microscopi es realitza segons les necessitats de les diferents tècniques de microscòpia. L'anomenada microscòpia, en poques paraules, és el mètode d'il·luminació que s'utilitza quan s'observa una mostra a través d'un microscopi, i la tècnica i mètode per obtenir un millor contrast en la imatge formada per la mostra. A continuació es descriu breument que la microscòpia ha madurat en diversos mètodes i el mètode d'ajust del sistema òptic d'imatge del microscopi corresponent.

1. Camp brillant de transmissió:
Aquest és el mètode d'aplicació més tradicional i comú des de la invenció del microscopi. Components bàsics: a. Lent objectiu: qualsevol lent objectiu es pot utilitzar per a l'observació de camp brillant; b. Telescopi: es poden utilitzar tot tipus de telescopis, preferiblement equipats amb un diafragma d'obertura. Mètode d'ajust: després d'ajustar el sistema d'il·luminació Kuhler del microscopi anterior, es pot aplicar el mètode de camp brillant. Àmbit d'aplicació: totes les seccions de teixit tacades, frotis de sang, etc. Precaucions: a. Quan s'utilitza el mètode d'observació de camp brillant, s'ha d'ajustar el sistema d'il·luminació Kuhler; b. El diafragma del camp de visió no s'ha d'obrir arbitràriament, i la lent frontal del mirall del condensador s'ha de plantejar de manera real cap a fora i cap a la trajectòria òptica, respectivament, quan s'utilitzen lents objectius de 10 ×, menys de 10 × i més de 10. ×; c. El diafragma d'obertura del mirall del condensador no s'ha d'utilitzar per ajustar la brillantor del camp de visió, i l'alçada del mirall del condensador no s'ha d'ajustar indistintament, o es reduirà la resolució del microscopi i la resolució del teixit tacat. es farà malbé. la resolució del microscopi i els danys s'han ajustat al sistema d'il·luminació Kuhler; d. Per a les micrografies, cada canvi en l'ús d'una ampliació de la lent de l'objectiu, heu d'ajustar el diafragma d'obertura de la lent del condensador, de manera que la seva mida sigui exactament igual a l'obertura numèrica utilitzada a la lent de l'objectiu de 2/3.

2. Mètode de contrast de fase de llum transmesa:
Aquest és un examen al microscopi modern d'un mètode de millora del contrast. Components bàsics: lent objectiu de contrast de fase, camp de visió brillant i visor multiusos de contrast de fase, telescopi d'enfocament, filtres verds.

Mètodes d'ajust:
a. A partir de l'ajust del sistema d'il·luminació Kuhler, focalitzeu la mostra clarament mitjançant el mètode de camp brillant

b. Gireu el telescopi a Ph1 per alinear la posició de l'escala del dial, trieu una lent d'objectiu de contrast de fase 10 × i substituïu la mostra transparent que s'ha d'observar.

c. Desendolleu un dels oculars, substituïu-lo per un telescopi centrat i centreu-vos en els dos anells de contrast de fase del camp de visió (l'anell de contrast de fase negre de la lent de l'objectiu i l'anell de contrast de fase de transmissió de la llum de la lent del condensador).

d. És possible que els dos anells de contrast de fase al camp de visió no coincideixin necessàriament, ajusteu els dos dispositius d'ajust al telescopi (ajustant les posicions esquerra i dreta de la palanca d'ajust de l'anell de contrast de fase i ajustant les posicions davantera i posterior del botó de fricció) , de manera que l'anell de transmissió de llum per a la part davantera i posterior cap a la dreta i l'esquerra coincideixi amb l'anell negre

e. Després de l'ajust, torneu a canviar a l'ocular per a l'observació i premeu el filtre verd al camí òptic per observar la imatge de contrast de fase de la mostra.

f. Quan hi ha lents d'objectiu de 20 × i 40 × per a l'observació, la lent d'observació s'ha de posar a la posició Ph2, i quan s'utilitzen 100 lents d'objectiu, la lent d'observació s'ha de posar a la posició Ph3.

Àmbit d'aplicació: És adequat per a l'observació de mostres transparents, sense taques o no tingudes, com ara tot tipus de cèl·lules, teixits vius, seccions de teixit sense taques o sense taques, organismes aquàtics, etc.

3. Mètode de contrast de fase d'interferència diferencial:
Per tal de superar el mètode de contrast de fase d'observació dels detalls de la mostra al voltant de la imatge acompanyats d'un halo, s'emmascara els detalls que s'haurien d'haver vist, així com les mostres o seccions de teixit requereixen un gruix bastant prim, en principi, es pot ser més gruixut que 10? m i altres limitacions, l'ús del principi d'interferència de doble feix per dissenyar el mètode de contrast de fase d'interferència subdiferencial.

Mètodes d'ajust:
a. El mètode DIC s'ha d'ajustar sobre la base que el sistema Kulemin ja s'ha ajustat

b. Utilitzant una lent objectiu 10 ×, determineu la posició d'enfocament de la lent objectiu que pugui veure la mostra clarament amb un camp de visió brillant.

c. Col·loqueu el polaritzador al camí d'il·luminació, tenint en compte que s'ha d'orientar en direcció est-oest.

d. Gireu el dial del condensador a la posició corresponent a l'ús de l'objectiu 10 ×, és a dir, DIC 0.3-0.4.

e. Inseriu el control lliscant DIC per a la lent de l'objectiu 10 × a la part posterior de la lent de l'objectiu o al convertidor d'objectius.

f. Inseriu l'analitzador al camí òptic d'imatge i tingueu en compte que la seva orientació ha de ser sud-nord.

g. Substituïu la mostra transparent a observar, enceneu la font de llum per enfocar la mostra clarament.

h. Ajusteu la inserció DIC de manera que la imatge de contrast d'interferència diferencial aconsegueixi el millor efecte, és a dir, l'efecte de relleu més evident.

i. Al mateix temps, ajusteu el diafragma d'obertura del mirall del condensador, de manera que l'efecte del contrast també sigui òptim.

j. A continuació, afineu els detalls de la mostra per veure l'estructura de la mostra a diferents nivells.

k. Si s'insereix el color complementari (placa de retard vermell de primer ordre) i s'ajusta la inserció DIC al mateix temps, es poden veure els colors brillants en constant canvi al camp de visió, amb vermell, taronja, groc, verd, blau, morat, rosa, rosa-violeta i groc daurat. Àmbit d'aplicació: seccions de teixit transparents o inestables, gruix de fins a uns 100 m, teixit viu i cèl·lules vives en cultiu, organismes vius petits, etc.