Una guia sobre els avantatges i els contres dels microscopis d'exploració làser multifotòn
1. Emocionada per la llum vermella o infraroja, la dispersió de la llum és petita i la dispersió de petites partícules és inversament proporcional a la quarta potència de la longitud d'ona.
2. Es poden recollir més fotons dispersos de la secció transversal-de la imatge sense necessitat de forats.
3. Els forats no poden distingir els fotons dispersos emesos de les àrees focals o desenfocades, i els multifotons tenen una millor relació senyal-a-en imatges profundes.
4. La llum ultraviolada o visible utilitzada per a l'excitació d'un sol fotó és fàcilment absorbida i atenuada per la mostra abans que el feix arribi al pla focal, dificultant l'excitació de les capes profundes.
5. Pel que fa a l'observació de la microscòpia biològica, la primera consideració és no danyar l'estat actiu del propi organisme, mantenir la circulació de l'aigua, la concentració d'ions, l'oxigen i els nutrients. En el camp de l'observació de la llum, tant l'energia tèrmica com la fotònica han de romandre dins de la dosi d'irradiació i l'energia lluminosa que no danyin les cèl·lules.
6. La microscòpia multifotònica té molts avantatges. Pel que fa a resolució tridimensional, invasió de profunditat, eficiència de dispersió, llum de fons, relació senyal-a-soroll, control, etc., hi ha característiques que els microscopis làser anteriors no posseeixen o no poden superar.
Desavantatges del microscopi d'exploració làser multifotòn:
1. Només per a imatges de fluorescència.
2. Si la mostra inclou cromòfors que poden absorbir llum d'excitació, la mostra pot estar sotmesa a danys tèrmics.
3. La resolució es redueix lleugerament, encara que es pot millorar utilitzant simultàniament petits forats confocals, hi ha pèrdua de senyal.
4. A causa de les limitacions dels làsers ultraràpids cars, el cost dels microscopis d'exploració multifotòn és relativament elevat.
