Quines especificacions de mostra es necessiten per a la microscòpia de llum?
En el procés de preparació de la mostra del microscopi òptic, el gruix de la porció de la mostra està entre 2-25um; el gruix del tall del microscopi electrònic es troba dins de 50-100nm (excepte el microscopi electrònic d'alta tensió, el gruix de la mostra pot arribar a 1 um), de manera que el mètode de tall utilitzat no és el mateix.
Pel que fa al portador, el portador de la secció del microscopi òptic és un portaobjectes de vidre, mentre que el portador de la secció del microscopi electrònic és la graella.
Pel que fa a la fixació, les rodanxes del microscopi òptic es fixen amb un fixador compost, mentre que les rodanxes del microscopi electrònic es fixen repetidament amb un únic fixador.
Pel que fa a la tinció, la tinció de mostres òptiques és relativament senzilla. Segons diferents mostres d'observació i tipus de microscopis òptics, normalment n'hi ha prou amb tacar amb alguns agents de tinció fixos. Hi ha molts i complicats mètodes per tornar a tenyir mostres de microscopi electrònic, com ara la tinció negativa, la tinció de plata, etc.
Pel que fa a l'incrustació, la parafina, el col·lodió, la gelatina, etc. s'utilitzen com a agents d'incrustació per a seccions de microscopi òptic; La resina epoxi, la resina de poliestirè, la resina d'isobutilè i la resina soluble en aigua s'utilitzen com a agents d'incorporació per a seccions de microscopi electrònic.
Per tal d'assegurar que el camp de visió del microscopi es pugui il·luminar de manera uniforme i completament, el sistema òptic d'il·luminació s'ha d'ajustar quan el microscopi s'instal·li i es depuri per primera vegada. Aquest és un mitjà important i la forma més bàsica d'utilitzar correctament el microscopi i obtenir resultats correctes i fiables. requisits. A més, dominar correctament l'ajust del sistema de camí òptic d'il·luminació és un pas necessari després de substituir la bombeta de la font de llum durant l'ús del microscopi, i també és un mitjà necessari per comprovar el rendiment del microscopi de tant en tant durant el dia. utilitzar. L'ajust del sistema de camí òptic d'il·luminació del microscopi inclou principalment els quatre elements següents: 1. Ajust preliminar de la cambra de la llum de la font de llum fora del microscopi ① Obriu primer la carcassa de la cambra de la làmpada, premeu el clip de molla per posar la bombeta halògena a la endoll i eviteu el contacte directe amb la bombeta amb els dits durant la instal·lació (es pot separar amb un drap suau o paper) per evitar que hi hagi empremtes dactilars i altra brutícia a la bombeta, que afectaran la vida útil de la bombeta. ②Coloqueu la casa del llum a la taula, després d'encendre l'alimentació, utilitzeu un tornavís especial per ajustar el forat del botó d'enfocament del llum (marcat amb "←→"), de manera que el filament es projecti a la paret 1-2 m de distància i s'ajusta la imatge del filament. A continuació, ajusteu l'alçada del llum i ajusteu el forat del fil (marcat amb "──") perquè la posició del filament sigui adequada; A continuació, ajusteu la posició esquerra i dreta del llum per ajustar el forat del cargol (marcat amb "──") per fer que la posició esquerra i dreta del filament sigui adequada.
2. L'objectiu de comprovar i corregir la posició de l'il·luminant (filament) de la font de llum al microscopi és ajustar l'extrem de la imatge de l'il·luminant directament al camp de visió de la lent de l'objectiu i assegurar-se que el camp de visió de el microscopi està totalment i uniformement il·luminat des de la perspectiva de la font de llum. Il·luminació, que és un requisit previ per ajustar el sistema d'il·luminació Kuhler. Eines bàsiques necessàries: el telescopi centrador està equipat quan es compra el microscopi. ① Desendolleu la funda de vidre esmerilat de la caseta del llum i torneu a col·locar-la al microscopi. ② Trieu una lent objectiu de 10 ×, engegueu el programa de font de llum per trobar la mostra i enfoca-la clarament i, a continuació, utilitzeu una lent objectiu de 40 × per enfocar la mostra amb claredat (lent objectiu de 40 × Podeu veure tota la imatge del filament). ); ③ Obriu el diafragma d'obertura i el diafragma de camp del condensador al màxim; ④ Desconnecteu un dels oculars, substituïu-lo amb un telescopi centrador, agafeu la part blanca, estireu l'ocular negre amb l'altra mà, podeu veure la imatge del filament al camp de visió; ⑤ Si la posició del filament no és adequada, ajusteu el forat "──" per ajustar la imatge del filament en direcció horitzontal i ajusteu el forat "──" per ajustar la imatge del filament en direcció vertical fins que ajusteu la imatge del filament. a la imatge circular lleugera que només omple l'obertura de la lent de l'objectiu; ⑥ Després de l'ajust, inseriu la funda de vidre esmerilat de nou a la posició original, desconnecteu el telescopi de centratge i substituïu l'ocular per al següent ajust. L'ajust esmentat anteriorment de la cambra de la làmpada de la font de llum d'il·luminació fora del microscopi i la verificació de la posició del cos lluminós de la font de llum dins del microscopi només s'han de dur a terme quan el microscopi s'instal·la i es depura per primera vegada i quan es substitueix la bombeta. , i el microscopi no es pot ajustar aleatòriament quan s'utilitza el microscopi. En cas de confusió, es pot ajustar de nou a l'estat original segons els passos anteriors.
3. Ajustament correcte del sistema d'il·luminació Kohler Una de les tasques principals de l'ajust correcte del microscopi és l'ajust del sistema de camí òptic d'il·luminació, i la clau és l'ajust del sistema d'il·luminació Kohler. Per a totes les persones que utilitzin un microscopi, especialment aquells que fan microfotografies, haurien de tenir una certa comprensió i domini del principi del sistema d'il·luminació Kuhler i els seus passos d'ajust per tal de poder jugar al màxim les funcions del microscopi i fer fotografies. Les fotos que surten poden ser més coherents i perfectes en efecte. El principi del sistema d'il·luminació Kohler és senzill: la llum emesa per qualsevol punt de l'il·luminant de la font de llum pot il·luminar el camp de visió del microscopi i es recull la llum emesa per cada punt de l'il·luminant de la font de llum, i al camp. de vista del microscopi S'aconsegueix una il·luminació molt completa i uniforme. L'objectiu d'ajustar el sistema d'il·luminació Kuhler és obtenir una il·luminació uniforme i suficient per al camp de visió observat i evitar que la llum dispersa afecti o interfereixi amb el sistema d'imatge, per tal d'evitar que la pel·lícula s'entengui durant la fotografia. Components necessaris per a un sistema d'il·luminació Kohler d'alt ajust: diafragma de camp, sistema de lents de condensador que es pot ajustar en l'eix. ① Seleccioneu 10× objectiu objectiu i 10× ocular ② Col·loqueu la lent frontal del condensador al camí òptic, ajusteu el diafragma d'obertura a una posició moderada (no massa gran ni petita) i, a continuació, aixequeu el condensador fins al posició superior i ajusteu la placa giratòria del condensador a la posició de camp brillant "J" ③ Ajusteu el diafragma de camp al mínim (0,1)
④ Posa la mostra biològica segellada a l'escenari, encén la font de llum i enfoca clarament
⑤ Hi haurà una àrea parcialment il·luminada o un punt brillant al camp de visió, que és la imatge borrosa del diafragma de camp, en la qual es poden veure clarament els detalls de la mostra; a l'exterior hi ha un camp de visió més fosc, que potser no necessàriament vegi els detalls de la mostra amb claredat
⑥Ajusteu lleugerament el condensador cap avall, de manera que el punt brillant del camp de visió es redueixi gradualment i es converteixi gradualment en una imatge poligonal clara, que és la imatge clara del diafragma de camp;
⑦ En general, la imatge poligonal no es troba al centre del camp de visió, i cal ajustar un parell de cargols de centratge del condensador per ajustar la imatge poligonal del diafragma de camp a la posició central;
⑧Obriu gradualment el diafragma del camp de visió per convertir la imatge del polígon en un polígon inscrit del camp de visió i comproveu encara més l'estat d'alineació. Si l'alineació no és ideal, continueu ajustant el cargol d'alineació;
⑨Obre lleugerament el diafragma del camp de visió, de manera que la seva imatge poligonal només desaparegui a la vora del camp de visió. Fins ara, s'ha completat l'ajust del sistema d'il·luminació Kohler. Després d'ajustar el sistema d'il·luminació Kohler, tot el camp de visió s'il·lumina uniformement i les micrografies preses són brillants i clares amb un contrast normal.
