Principi de funcionament del microscopi confocal làser
Principi de funcionament del microscopi confocal làser
El microscopi confocal làser Olympus és un detector que pot adquirir senyals. El seu principi de funcionament és que una font de llum puntual s'imaginarà com un punt ampliat anomenat "Disc Airy" després de passar per un microscopi de fluorescència. En un microscopi confocal interferomètric de llum blanca estàndard, la llum emesa fora del pla focal està bloquejada per un forat la mida del qual determina quant del disc Airy pot entrar al detector. Com més petit és el forat, més nítida és la imatge resultant i més tènue és la imatge perquè es perd la major part de la llum. Com més petit sigui el forat d'obertura, millor serà la resolució, però, de nou, més senyal de llum es perd. El microscopi confocal làser Olympus pot proporcionar una imatge CCD en color i una imatge confocal d'escaneig làser alhora. Els microscopis làser confocals Olympus són capaços de mesurar l'alçada mitjançant una configuració confocal d'una font de llum, una mostra i un detector. Quan la mostra es troba al pla focal de la lent de l'objectiu i la llum làser reflectida per la superfície de la mostra s'enfoca a l'obertura confocal, el fotodetector rebrà el senyal de la mostra. Quan la mostra està en la posició desenfocada, l'obertura confocal no rep el senyal làser, de manera que només es recull el senyal enfocat. Aquesta característica pot realitzar la funció de secció òptica del microscopi confocal làser Olympus.
Avantatges de la microscòpia làser confocal
1. Utilitzant llum làser com a font de llum, després de marcar les sondes fluorescents corresponents, la mostra s'escaneja punt per punt per obtenir imatges de secció transversal òptica bidimensional capa per capa. Té la funció de "TC cel·lular" i pot ser compatible amb un programari de reconstrucció tridimensional d'ordinador per obtenir imatges tridimensionals, que es poden girar en qualsevol angle per observar la forma tridimensional i la relació espacial de cèl·lules i teixits;
2. Pot observar cèl·lules i teixits vius sense danys, i mesurar dinàmicament la informació fisiològica de les cèl·lules vives com la concentració d'ions Ca i el valor del pH a les cèl·lules;
3. Pot mesurar la fluïdesa de la membrana cel·lular, la comunicació intercel·lular, la fusió cel·lular, l'elasticitat del citoesquelet, etc., i es pot utilitzar com a "ganivet lleuger" per completar la "cirurgia" intracel·lular. Aquesta tecnologia permet l'observació i el mesurament dinàmics i quantitatius in situ de cèl·lules i teixits vius.
