Hi ha dos tipus de microscopis de fluorescència en funció dels seus camins de llum.
1. Microscopi de fluorescència de transmissió: la font de llum d'excitació travessa el material de la mostra a través d'un condensador per excitar la fluorescència. S'utilitza habitualment un col·lector de camp fosc, o es pot utilitzar un col·lector normal, i el reflector s'ajusta per desviar i radiar lateralment la llum d'excitació a la mostra. Aquest és un microscopi de fluorescència més antic. L'avantatge és que la fluorescència és forta amb un augment baix, però el desavantatge és que la fluorescència es debilita a mesura que augmenta la magnificació. Per tant, és millor observar materials de mostra més grans.
2. El microscopi epifluorescència és un nou tipus de microscopi de fluorescència desenvolupat en els temps moderns. La diferència amb l'anterior és que la llum d'excitació cau cap avall des de la lent objectiu fins a la superfície de la mostra, és a dir, s'utilitza la mateixa lent objectiu com a condensador d'il·luminació i la lent objectiu per recollir fluorescència. Cal afegir un divisor de feix de dos colors al camí òptic, que és del 45% amb l'urani òptic. Angle, la llum d'excitació es reflecteix a la lent de l'objectiu i es concentra a la mostra. La fluorescència generada per la mostra i la llum d'excitació reflectida per la superfície de la lent de l'objectiu i la superfície del vidre de la coberta entren a la lent de l'objectiu alhora i tornen al divisor de feix dicromàtic, de manera que la llum d'excitació Separada de la fluorescència, l'excitació residual Aleshores, la llum és absorbida pel filtre de bloqueig. Si utilitzeu diferents insercions de combinació de filtres d'excitació/divisor de feix de doble color/filtre de bloqueig, podeu satisfer les necessitats de diferents productes de reacció de fluorescència. L'avantatge d'aquest tipus de microscopi de fluorescència és que el camp de visió s'il·lumina uniformement, la imatge és clara i com més gran sigui l'augment, més forta serà la fluorescència.
(2) Com utilitzar el microscopi de fluorescència.
1. Enceneu la font de llum i la làmpada de mercuri d'ultra-alta pressió s'ha d'escalfar durant uns quants minuts per arribar al seu punt més brillant.
2. Els microscopis de fluorescència de transmissió requereixen que s'instal·li el filtre d'excitació necessari entre la font de llum i el condensador, i el filtre de bloqueig corresponent s'instal·li darrere de la lent de l'objectiu. Els microscopis d'epifluorescència han d'inserir el filtre d'excitació requerit/divisor de feix de doble color/insert de filtre de bloqueig a la ranura del camí de la llum.
3. Utilitzeu un microscopi de baix augment per observar, i ajusteu el centre de la font de llum segons els dispositius d'ajust dels diferents models de microscopis de fluorescència de manera que estigui situat al centre de tot el punt d'il·luminació.
4. Col·loqueu la peça de mostra i ajusteu el focus per observar. Si us plau, presteu atenció durant l'ús: no observeu el filtre directament amb els ulls per evitar danys oculars; quan observeu l'exemplar amb una lent d'oli, heu d'utilitzar una lent d'oli especial no fluorescent; la làmpada de mercuri d'alta pressió no es pot tornar a obrir immediatament després d'apagar-la. Es pot tornar a iniciar al cap de 5 minuts, en cas contrari serà inestable i afectarà la vida útil de la làmpada de mercuri.
(3) Observeu sota el microscopi de fluorescència a la plataforma d'ensenyament mitjançant un filtre de llum blau-violeta. Es pot veure que el passatge és o. A les cèl·lules tenyides amb un colorant fluorescent taronja d'acridina al 01%, el nucli i el citoplasma s'excitan per produir dos colors diferents de fluorescència (verd fosc i vermell taronja).
