El mètode de preparació de portaobjectes de microscopi
1. Mètode de frotis
El mètode d'untat és un mètode per preparar diapositives recobrint-hi uniformement materials.
Els materials de frotis inclouen organismes unicel·lulars-, algues petites, sang, medis de cultiu bacterians, teixits solts d'animals i plantes, testicles, anteres, etc.
Quan s'ha d'untar, s'ha de parar atenció a:
(1) S'ha de netejar el portaobjectes de vidre.
(2) La porta de vidre ha de ser plana.
(3) El recobriment ha de ser uniforme. Apliqueu la gota a la part central dreta del portaobjectes de vidre i esteneu-la uniformement amb una fulla de dissecció o un escuradents.
(4) El recobriment ha de ser prim. Utilitzant una altra diapositiva de vidre com a diapositiva, premeu suaument de dreta a esquerra al llarg de la superfície de la diapositiva de vidre amb el líquid aplicat (l'angle entre les dues diapositives ha de ser de 30 a 45 graus) i apliqueu una capa fina uniforme.
(5) Fixa. Si es requereix fixació, es poden utilitzar fixadors químics o mètodes d'assecat (bacteris) per a la fixació.
(6) Tinció. Els bacteris utilitzen blau de metilè i la sang utilitza una solució de tinció de Wright. La solució de tinció ha de cobrir tota la superfície del recobriment.
(7) Esbandida. Utilitzeu paper absorbent per absorbir o assecar.
(8) Segellar la pel·lícula. Conservació a llarg termini amb pel·lícula d'arbres canadenc.
2. Mètode de premsat de tauletes
El mètode de compressió és un mètode per tallar materials biològics col·locant-los entre un portaobjectes de vidre i una coberta, aplicant una certa pressió per dispersar les cèl·lules dels teixits.
El procés general del mètode de premsat de tauletes:
(1) Selecció de material. Per observar la divisió cel·lular, s'han de seleccionar cèl·lules de teixit fresques amb una divisió cel·lular vigorosa com a materials. Com ara la punta de l'arrel, el meristema de la punta de la tija, les cèl·lules de la medul·la òssia, les anteres (cèl·lules mare del pol·len). Nius d'esperma (espermatòcits), etc.
(2) Fixa. La fixació del material es pot determinar segons les necessitats i la mostra s'ha de comprimir i observar immediatament. No és necessari realitzar un tractament de fixació per separat (sincrònic amb la tinció); Si el material no s'inspecciona immediatament després del mostreig, es pot arreglar amb un fixador (normalment fixador d'alcohol àcid acètic). Després de fixar durant 2-24 hores (segons el material), esbandiu amb etanol al 95% i emmagatzemeu-lo en etanol al 70% per a un ús posterior.
(3) Separació. Els materials que no es dispersen fàcilment per les cèl·lules s'han de tractar amb una solució de separació per hidròlisi (com ara HCl 1N o semen d'àcid clorhídric) durant 6-20 minuts. Després de la dissociació, s'han de rentar amb aigua abans de tacar-les.
(4) Tinció. Hi ha molts tipus de colorants. Els cromosomes es tenyeixen habitualment amb una solució de tinció magenta d'àcid acètic.
(5) Premeu la tauleta. Col·loqueu el material en un portaobjectes de vidre, afegiu-hi una gota d'aigua o solució de colorant, cobreixi el portaobjectes amb una tapa i premeu-lo suaument amb el polze.
(6) Observa. Després de la compressió, es pot observar al microscopi.
