L'ús correcte de la microscòpia de fluorescència invertida
El microscopi de fluorescència invertida és un microscopi multifuncional utilitzat en el camp de la investigació de la ciència biològica de gamma alta. La seva estructura és complexa i cara. Per tant, per tal que els estudiants de postgrau en medicina dominin correctament els estàndards de funcionament i ús del microscopi de fluorescència invertida, els professors han d'ensenyar primer els coneixements bàsics del microscopi de fluorescència invertida abans de demostrar el funcionament real del microscopi de fluorescència invertida. Haurien d'introduir l'estructura, el principi, la funció i els mètodes bàsics d'ús del microscopi de fluorescència invertida i, a continuació, demostrar diferents funcions per a diferents mostres en operacions d'ús específiques, fent que el funcionament i l'ús del microscopi de fluorescència invertida estiguin estandarditzats gradualment per als estudiants de postgrau en medicina.
1. Ús correcte de l'observació visual. Una de les funcions d'un microscopi de fluorescència invertida és observar en un camp de visió brillant. El seu principi bàsic és aconseguir la imatge en un fons brillant a partir de la diferent absorció de llum de cada part de l'exemplar després d'haver estat il·luminada per llum. És adequat principalment per observar cèl·lules tacades o acolorides, rodanxes de teixit i altres exemplars.
2. Ús correcte de l'observació diferencial. La segona funció del microscopi de fluorescència invertida és l'observació de la diferència de fase. El seu principi bàsic és convertir la diferència de camí òptic de diferents parts de la mostra en diferència d'amplitud i observar a través d'un objectiu de diferència de fase amb una placa de fase i un focus amb una obertura circular. És adequat principalment per observar cèl·lules vives o rodanxes de teixit sense tacar. En el procés d'ensenyament experimental, a més d'orientar correctament els estudiants de postgrau en medicina per seguir els mètodes operatius bàsics d'observació de la diferència de fase, és més important guiar-los per comprendre i dominar els exemplars mitjançant l'observació de la diferència de fase. Per a ells, el mètode més utilitzat en futures investigacions científiques és l'observació microscòpica de cèl·lules cultivades. En primer lloc, per a la selecció d'equips cel·lulars, generalment es recomana utilitzar plats de cultiu, plaques i ampolles de vidre i materials plàstics. Són majoritàriament incolors i transparents, i es poden observar directament sota un microscopi de fluorescència invertida sense necessitat d'abocar fluid cel·lular o de sotmetre's a altres tractaments. En segon lloc, durant l'observació microscòpica, no obriu la tapa de l'equip casualment per evitar contaminar les cèl·lules. Finalment, per als operaris, s'han de fer servir guants, màscares i bates blanques no només per protegir la seva pròpia salut, sinó també per evitar la contaminació cel·lular.
3. Ús correcte de l'observació de fluorescència. La tercera funció d'un microscopi de fluorescència invertida és l'observació de fluorescència. El seu principi bàsic és utilitzar llum d'excitació per excitar la mostra per produir fluorescència, aconseguint així l'observació de la forma i el posicionament de la mostra. És adequat principalment per observar mostres marcades amb fluorescència. L'observació de fluorescència és una funció important de la microscòpia de fluorescència invertida, amb accessoris cars i un ús especial. Per tal que els estudiants de postgrau en medicina dominin correctament les normes de funcionament de l'observació de fluorescència, els professors no només els ensenyen els mètodes operatius bàsics, sinó que, el que és més important, els ensenyen la singularitat. En primer lloc, en la preparació de la mostra, la superfície de la diapositiva i el vidre de la coberta ha de ser llisa i el gruix ha de ser adequat (la diapositiva ha d'estar entre 0, 8 mm i 1,2 mm, i el vidre de la coberta ha d'estar al voltant de {{5 }}.17 mm); La mostra ha de tenir un gruix adequat alhora que s'evita la superposició cel·lular o l'emmascarament d'impureses; L'agent segellador ha d'utilitzar una barreja igual de glicerol i tampó carbonat (0,5 mol/L pH 9,0-9,5). En segon lloc, abans de l'observació de fluorescència, s'han d'apagar les llums de l'habitació i la llum blanca del microscopi de fluorescència invertida per assegurar-se que es troben en un ambient fosc. Finalment, en l'observació de fluorescència, el temps d'observació s'ha de controlar estrictament, generalment 1-2 hores per temps, en cas contrari la fluorescència decairà i desapareixerà; Quan s'ajusta la font de llum, s'han d'utilitzar ulleres protectores per evitar danys UV a les ulleres.
4. Ús correcte de la captura d'imatges. En la investigació científica, no només es requereix que la microscòpia de fluorescència invertida pugui aconseguir múltiples observacions, sinó també que la microscòpia de fluorescència invertida pugui aconseguir la captura d'imatges. El sistema de microscopi de fluorescència invertida combina un microscopi òptic amb un ordinador mitjançant la conversió fotoelèctrica, permetent no només l'observació microscòpica a l'ocular, sinó també l'observació, l'edició i l'emmagatzematge d'imatges dinàmiques en temps real a l'ordinador.
