Habilitats i mètodes d'ús del microscopi de fluorescència
Paràmetres tècnics del microscopi de fluorescència 1. Ocular gran angular 2. Objectiu acromàtic 3. Convertidor d'objectius de quatre forats 4. Dispositiu d'emissió de fluorescència blau (b) verd (g) sistema d'excitació Làmpada de mercuri 100W 5. Coaxial gruixut mecanisme de microenfocament: rang d'enfocament 15 mm, valor de microquadrícula 0,002 mm 6. Interval de moviment longitudinal del banc de treball mecànic de doble capa: 70 mm, rang de moviment lateral: 50 mm.
Habilitats i mètodes d'ús del microscopi de fluorescència
(1) diapositives de vidre
El gruix de la diapositiva ha d'estar entre 0.8-1,2 mm i 1,2 mm. Una diapositiva massa gruixuda no absorbirà molta llum d'una banda i, de l'altra, no farà que la llum d'excitació es reuneixi a l'exemplar. La diapositiva ha de ser llisa, de gruix uniforme i lliure de fluorescència espontània evident. De vegades es necessiten diapositives de vidre Shi Ying.
(2) Vidre cobert
El vidre de la coberta té un gruix d'aproximadament 0,17 mm i és llis. Per millorar la llum d'excitació, també es pot utilitzar un vidre de coberta d'interferència, que és una mena de vidre de coberta especial amb diverses capes de substàncies (com ara fluorur de magnesi) que tenen diferents efectes d'interferència en diferents longituds d'ona de la llum. Pot fer que la fluorescència passi sense problemes i reflecteixi la llum d'excitació, i aquesta llum d'excitació reflectida pot excitar la mostra.
(3) Exemplars
Les seccions de teixit o altres exemplars no han de ser massa gruixudes. Si és massa gruixut, la major part de la llum d'excitació es consumeix a la part inferior de l'exemplar, mentre que la part superior observada directament per la lent de l'objectiu no s'excita del tot. A més, la superposició cel·lular o l'emmascarament d'impureses afecta el judici.
(4) agent de segellat
El glicerol s'utilitza habitualment com a agent de segellat, que ha de ser incolor i transparent sense fluorescència espontània. La brillantor de la fluorescència és brillant a pH 8,5 ~ 9,5 i no és fàcil esvair ràpidament. Per tant, la barreja equivalent de glicerol i 0,5 mol/l PH9.0 ~ 9,5 tampó de carbonat s'utilitza sovint com a agent de segellat.
(5) oli de mirall
En general, s'ha d'utilitzar oli mirall quan s'observen mostres amb un microscopi de fluorescència de camp fosc i un mirall d'oli. El millor és utilitzar oli especial de mirall no fluorescent, o es pot utilitzar la glicerina anterior. També es pot utilitzar parafina líquida, però l'índex de refracció és baix, la qual cosa té un lleuger impacte en la qualitat de la imatge.
