Mètodes de processament de mostres i passos per a la microscòpia electrònica
Abans d'utilitzar un microscopi electrònic de transmissió per observar mostres biològiques, les mostres s'han de processar prèviament. Els científics utilitzen diferents mètodes de processament segons els requisits de recerca diferents.
Fixació: per tal de preservar la mostra al màxim, s'utilitza glutaraldehid per endurir la mostra i l'àcid osmic per tacar el greix.
Fixació en fred: la mostra es congela ràpidament en etan líquid perquè l'aigua no cristal·litzi i en canvi formi gel amorf. Les mostres conservades d'aquesta manera tenen menys danys, però el contrast de la imatge és molt baix.
Deshidratació: utilitzar etanol i acetona per substituir l'aigua.
Encoixinat: la mostra es pot dividir després de ser encoixinada.
Segmentació: la mostra es talla en rodanxes fines amb un disc de diamant.
Tinció: els àtoms pesats com el plom o l'urani dispersen els electrons amb més força que els àtoms més lleugers i, per tant, es poden utilitzar per augmentar el contrast.
Abans d'utilitzar un microscopi electrònic de transmissió per observar metalls, la mostra ha de ser
Virus sota un microscopi electrònic
Tallar en rodanxes molt fines (uns 0,1 mm) i després utilitzar el poliment electrolític per continuar aprimant el metall sovint acaba formant un forat al centre de la mostra on els electrons poden passar a través del metall molt prim que hi ha. Els metalls que no es poden polir electrolíticament o els materials que no són conductors o tenen una conductivitat deficient, com el silici, generalment s'apriman mecànicament i després es processen mitjançant un cop d'ions. Per evitar que les mostres no conductores acumulin electricitat estàtica en un microscopi electrònic d'escaneig, les seves superfícies s'han de cobrir amb una capa conductora.
Per què els microscopis electrònics tenen una resolució més alta?
Com el seu nom indica, l'anomenat microscopi electrònic és un microscopi que utilitza feixos d'electrons com a font d'il·luminació. Atès que el feix d'electrons es pot doblegar sota l'acció d'un camp magnètic extern o un camp elèctric, formant un fenomen de refracció similar al de la llum visible que passa a través del vidre, podem utilitzar aquest efecte físic per crear una "lent" per al feix d'electrons, de manera que desenvolupament d'un microscopi electrònic. La característica d'un microscopi electrònic de transmissió (TEM) és que utilitzem feixos d'electrons que travessen la mostra a la imatge, que és diferent d'un microscopi electrònic d'escaneig (Scanning Electron Microscope, SEM). Com que la longitud d'ona de les ones d'electrons és molt més petita que la de la llum visible (la longitud d'ona de les ones d'electrons d'100kV és de 0,0037 nm, mentre que la longitud d'ona de la llum violeta és de 400 nm), segons l'òptica. En teoria, podem esperar que el poder de resolució dels microscopis electrònics sigui molt millor que el dels microscopis òptics. De fet, la capacitat de resolució dels microscopis electrònics moderns ha arribat als 0,1 nm. El llibre de text optatiu de física per a estudiants de batxillerat ho explica amb més detall (petita informació darrere de l'efecte fotoelèctric)
