Principi, característiques i ús del microscopi de fluorescència
El principi i les característiques estructurals del microscopi de fluorescència: el microscopi de fluorescència utilitza una font de llum puntual altament eficient per emetre una certa longitud d'ona de llum (com ara la llum ultraviolada 3650 o la llum blava porpra 4200) a través d'un sistema de filtre de color com a llum d'excitació, que excita les substàncies fluorescents de l'exemplar per emetre diversos colors de fluorescència i, a continuació, observar la fluorescència a través de l'ampliació i l'objectiu. D'aquesta manera, fins i tot amb una fluorescència feble en un fons fort, és fàcil de reconèixer i té una alta sensibilitat. S'utilitza principalment per a l'estudi de l'estructura cel·lular, la funció i la composició química. L'estructura bàsica d'un microscopi de fluorescència es compon d'un microscopi òptic normal i alguns accessoris com ara una font de llum fluorescent, filtre d'excitació, divisor de feix de color dual i filtre de bloqueig. La font de llum fluorescent - normalment utilitza làmpades de mercuri d'ultra-alta pressió (50-200 W), que poden emetre llum de diverses longituds d'ona, però cada substància fluorescent té una longitud d'ona de llum d'excitació que produeix la fluorescència més forta. Per tant, s'han d'afegir filtres d'excitació (generalment filtres d'excitació ultraviolats, morats, blaus i verds) per permetre que només una certa longitud d'ona de llum d'excitació passi i irradii l'exemplar, mentre absorbeix tota la resta de llum. Després de ser irradiada amb llum d'excitació, cada substància emet fluorescència visible amb una longitud d'ona més gran que la longitud d'ona d'irradiació en un període de temps molt curt. La fluorescència té especificitat i és generalment més feble que la llum d'excitació. Per observar una fluorescència específica, cal afegir un filtre de bloqueig (o supressió) darrere de la lent de l'objectiu.
Les seves funcions són dobles: en primer lloc, absorbir i bloquejar l'entrada de llum d'excitació a l'ocular per evitar pertorbar la fluorescència i danyar els ulls; segon, seleccionar i deixar passar una fluorescència específica, mostrant un color fluorescent específic. S'han d'utilitzar dos tipus de filtres en combinació.
