Microscopi paràmetres tècnics comuns i noms propis
Apertura numèrica NA
L'obertura numèrica NA es refereix a l'índex de refracció (η) del medi entre la lent frontal de la lent de l'objectiu i la mostra multiplicat per la meitat de l'angle d'obertura (u). La relació és NA=η·sinu/2. És el principal paràmetre tècnic de la lent de l'objectiu i la lent del condensador. Un indicador important per jutjar el rendiment de la lent de l'objectiu està marcat a la carcassa de la lent de l'objectiu.
Com més gran sigui l'obertura numèrica, millor serà la qualitat de la imatge. L'angle d'obertura no es pot canviar quan s'observa la lent de l'objectiu, i el NA es pot canviar mitjançant el canvi de l'índex de refracció de diferents mitjans. Per tant, lent objectiu d'immersió en aigua derivada, lent objectiu d'immersió en oli. Aigua η{{0}}.333, la lent d'objectiu d'immersió en aigua NA pot ser 0.1~1.25; oli de cedre η=1.515, la lent d'objectiu d'immersió en oli NA pot ser de 0,80 ~ 1,45; nou anell bromonaftalè η=1,66, lent objectiu NA Major o igual a 1,40.
L'obertura numèrica és directament proporcional a la resolució, l'ampliació i la brillantor de la imatge, i inversament proporcional a la profunditat d'enfocament. A mesura que augmenta la NA, l'amplada del camp de visió i la distància de treball disminueixen en conseqüència.
resolució
La resolució es refereix a la distància de resolució mínima a la qual els punts de llum mostren diferències en el procés d'imatge, expressada com d{{0}}λ/NA, on d és la distància de resolució mínima, λ és la longitud d'ona de la fibra, i NA és l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu. Es pot veure que com més gran és NA, més curt és λ, més petit és d i més gran és la resolució. Les fonts de llum visible només poden resoldre dos punts d'objecte a una distància de 0,4 μm.
La millora de la resolució depèn de 4 factors relacionats: 1. Utilitzant una font de llum amb una longitud d'ona més curta, λ disminueix; 2. Utilitzant un medi amb un índex de refracció més alt, augmenta η i augmenta NA; 3. Dissenyar i fabricar un angle d'obertura més gran de la lent de l'objectiu; 4. Augmenta el contrast clar i fosc de la imatge i millora la claredat de la imatge.
guany
profunditat de focus
Es refereix a la profunditat del punt focal, és a dir, el rang d'interval per sobre i per sota del pla focal de la mostra que també s'observa clarament. Com més gran sigui la profunditat del focus, més capes de la mostra estaran enfocades.
① La profunditat d'enfocament és inversament proporcional a l'ampliació total, l'obertura numèrica de la lent de l'objectiu i la resolució de la imatge. Com més gran sigui l'ampliació, més gran serà el valor de NA, menor serà la profunditat d'enfocament i més alta serà la resolució.
②L'índex de refracció del medi circumdant, com ara l'agent de muntatge preparat per la mostra, augmenta i la profunditat de focus es fa més gran.
Amplada del camp de visió
Es refereix al rang real de la mostra continguda en el camp de visió circular del microscopi, també conegut com el diàmetre del camp de visió. Com més gran sigui, més gran serà la quantitat d'informació de mostra.
①L'amplada del camp de visió és proporcional al nombre de camps de visió de l'ocular. Si l'augment de l'ocular és constant, com més gran sigui el nombre de camp de visió, més gran serà l'amplada del camp de visió, cosa que és convenient per a l'observació (Nota: el nombre de camp de visió es refereix a l'amplada del camp de visió). vista de l'ocular, expressada per FN, i marcada a la carcassa exterior de l'ocular). ②L'augment de la lent de l'objectiu augmenta i l'amplada del camp de visió es fa més petita. És a dir, es pot veure tota la imatge sota la lent de baixa potència i la part es pot veure sota la lent d'alta potència.
mala cobertura
L'estàndard internacional per al gruix del vidre de coberta de mostra és de 0,17 mm. La lent de l'objectiu s'ha corregit per a aquesta diferència de fase i s'ha marcat a la carcassa. Quan la llum travessa la coberta de vidre de gruix no estàndard i entra a l'aire, es produeix la refracció i la diferència de fase causada s'anomena diferència de cobertura.
La mala cobertura afecta la qualitat de la imatge microscòpica. Quan observeu mostres, heu d'entendre els tres punts següents:
(1) Com més gran sigui l'ampliació, més gran serà el valor de NA i més òbvia serà la diferència de cobertura. A mesura que augmenta el gruix del cobreobjectes, augmenta la mala cobertura i es fa difícil l'enfocament.
(2) La lent de l'objectiu d'immersió en oli no té el problema d'una cobertura deficient, perquè l'índex de refracció de l'oli i el vidre de la coberta són 1,52, formant un sistema òptic uniforme.
(3) Com més gran sigui el valor NA de la lent de l'objectiu, menor serà l'error admissible del gruix del vidre de la coberta i més estrictes són els requisits de qualitat per al gruix del vidre de la coberta.
distància de treball
Es refereix a la distància entre la superfície frontal de la lent de la lent de l'objectiu i la mostra, també coneguda com a distància de l'objecte. Quan s'observa, la mostra ha d'estar a 1 ~ 2 de la distància focal de la lent de l'objectiu. Ell i la distància focal són dos conceptes. L'enfocament del microscopi està en realitat ajustant la distància de treball.
Quan l'obertura numèrica (NA) de la lent de l'objectiu és constant, si s'escurça la distància de treball, s'ha d'augmentar l'angle d'obertura. El NA de la lent de l'objectiu d'alta ampliació és gran i la distància de treball es fa petita.
Brillantor del mirall vs brillantor del camp
(1) La brillantor de la imatge mirall és la brillantor de la imatge, que indica la brillantor i la foscor de la imatge observada pels ulls, i cal que no sigui tènue, enlluernadora o fatigada.
(2) La brillantor del camp de visió és la claredat i la foscor del camp de visió sota el microscopi, que es veu afectada per diversos factors com ara la lent de l'objectiu, l'ocular i la intensitat de la font de llum.
Hi ha dos punts principals sobre la relació entre la brillantor del mirall i altres paràmetres tècnics del microscopi.
(1) La brillantor de la imatge mirall és proporcional al quadrat de l'obertura numèrica (NA). En les mateixes condicions, la brillantor de la lent de l'objectiu amb un gran NA es millora significativament.
(2) La brillantor de la imatge mirall és inversament proporcional al quadrat de l'ampliació total. En les mateixes condicions, l'augment de l'ocular augmenta i la brillantor de la imatge mirall disminueix.
