Mètode de fabricació de làmines de microscopi
Hi ha tres mètodes per fer diapositives de microscopi:
1. Mètode de frotis
El mètode de frotis és un mètode de preparació en què el material s'estén uniformement sobre la diapositiva.
Els materials de frotis inclouen organismes unicel·lulars, petites algues, sang, cultius bacterians, teixits solts de plantes i animals, nius d'esperma, anteres, etc.
S'ha de parar atenció a l'hora d'untar:
(1) El tobogan ha d'estar net.
(2) El tobogan s'ha de mantenir plana.
3) El recobriment ha de ser uniforme. Apliqueu la gota de líquid de recobriment a la dreta del centre de la diapositiva i esteneu-la bé amb la fulla d'un ganivet de dissecció o un escuradents, etc.
4) El recobriment ha de ser prim. Utilitzeu una altra diapositiva com a polsador, premeu suaument de dreta a esquerra al llarg de la superfície de la diapositiva amb la gota de solució d'aplicació (l'angle entre les dues diapositives ha de ser de 30 a 45 graus) i apliqueu una capa uniformement prima.
5) Fixació. Si cal una fixació, utilitzeu fixador químic o fixació de dessecació (bacteriana).
6) Tinció. Utilitzeu blau de metilè per als bacteris i la taca de Rachel per a la sang. La solució de tinció ha de cobrir tota la superfície recoberta.
7) Esbandida. Absorbir sobre paper absorbent o assecar al forn.
8) Segellar la pel·lícula. Per a l'emmagatzematge a llarg termini, utilitzeu una pel·lícula d'arbre canadenca.
2. Mètode de premsat pel·lícula
El mètode de la pel·lícula de pressió és el material biològic col·locat entre la diapositiva i el full de coberta, aplicant una determinada pressió, les cèl·lules del teixit es pressionaran separant un mètode de preparació.
(1) agafar material. L'observació de la divisió cel·lular, la divisió cel·lular s'han de seleccionar cèl·lules de teixit exuberants i fresques com a materials. Com ara puntes d'arrel, teixit meristemàtic de punta de tija, cèl·lules de medul·la òssia, anteres (cèl·lules mare del pol·len). Niu d'espermatozoides (espermatogonia) i així successivament.
(2) Fixació. La fixació del material es pot determinar segons la necessitat, immediatament després de fer l'observació de la pel·lícula de pressió del material, no es pot fer un tractament fix separat (i tinció sincrònica); prendre el material no és immediatament després de la inspecció, el material es pot arreglar amb un fixador (generalment amb fixador d'acetat d'alcohol). Fixat 2 ~ 24 hores (segons el material) després del rentat amb etanol al 95%, conservat en etanol al 70%, en espera.
(3) Dissociació. Les cèl·lules no són fàcils de dispersar el material amb una solució de separació d'hidròlisi (com ara HCl 1N o àcid clorhídric una solució alcohòlica), tractament general 6 ~ 20 min, després de la dissociació i esbandida amb aigua abans de la tinció.
(4) Tinció. Hi ha molts tipus de taques. L'observació de cromosomes s'utilitza habitualment per tenyir amb una solució de tinció d'acetat magenta.
(5) Prematge cinematogràfic. Col·loqueu el material sobre un portaobjectes, afegiu-hi una gota d'aigua o solució de tinció, tapeu el cobreobjectes i premeu suaument el portaobjectes amb el polze.
(6) Observació. Després de prémer la pel·lícula, es pot observar al microscopi.
