Introducció als principis bàsics de la microscòpia de contrast de fase
La microscòpia de contrast de fase és un microscopi especial que converteix la diferència de camí òptic (és a dir, diferència de fase) generada quan la llum passa a través dels detalls d'una mostra transparent en una diferència d'intensitat de llum.
Quan la llum travessa una mostra relativament transparent, no hi ha cap canvi evident en la longitud d'ona (color) i l'amplitud (brillantor) de la llum. Per tant, quan s'observen exemplars no tacats (com ara cèl·lules vives) amb un microscopi òptic normal, la seva morfologia i estructura interna sovint són difícils de distingir. Tanmateix, a causa de les diferències en l'índex de refracció i el gruix de diverses parts de la cèl·lula, quan la llum travessa aquest exemplar, les longituds del camí òptic de la llum directa i la llum difractada seran diferents. A mesura que la longitud del camí òptic augmenta o disminueix, la fase de les ones de llum que s'acceleren o queden enrere canvia (crea una diferència de fase). La diferència de fase de la llum no es pot sentir a ull nu, però el microscopi de contrast de fase pot utilitzar el seu dispositiu especial: diafragma anular i placa de fase per utilitzar el fenomen d'interferència de la llum per convertir la diferència de fase de la llum en una diferència d'amplitud (llum i fosc) que pot ser detectat per l'ull humà. diferència), de manera que l'objecte transparent original mostra diferències òbvies en la llum i la foscor, i el contrast es millora, cosa que ens permet observar amb més claredat les cèl·lules vives i els components intracel·lulars que no es poden veure o no es poden veure clarament amb microscopis òptics ordinaris i camp fosc. microscopis. determinades microestructures.
Principi d'imatge del microscopi de contrast de fase: la font de llum per a l'examen microscòpic només pot passar per l'anell transparent del diafragma anular i després condensar-se en un feix de llum pel condensador. Quan aquest feix de llum travessa l'objecte a inspeccionar, la llum serà diferent a causa de les diferents longituds del camí òptic de cada part. grau de deflexió (difracció). Perquè la imatge formada per l'anell transparent coincideix amb el pla focal posterior de la lent de l'objectiu i el pla conjugat de la placa de fase. Per tant, la llum directa no desviada travessa la superfície conjugada, mentre que la llum difractada desviada passa per la superfície de compensació. A causa de les diferents propietats de la superfície conjugada i de la superfície de compensació de la placa de fase, produiran una certa diferència de fase i un debilitament d'intensitat a la llum que passa per aquestes dues parts respectivament. Aleshores, els dos conjunts de llum convergen per la lent posterior i tornen al mateix camí òptic. Viatjant, la llum directa i la llum difractada interferiran entre si, canviant la diferència de fase en una diferència d'amplitud. D'aquesta manera, durant la microscòpia de contrast de fase, la llum que travessa el cos transparent incolor converteix la diferència de fase que és indistinguible per l'ull humà en una diferència d'amplitud (diferència entre llum i foscor) que l'ull humà pot distingir.
