Com triar entre microscopi invertit i microscopi de fluorescència?
El microscopi és un instrument important en el cultiu cel·lular i experiments derivats relacionats. Actualment, hi ha diversos tipus de microscopis al mercat, i escollir un microscopi que s'ajusti a les necessitats i sigui adequat és un repte. A continuació, presentarem els principis dels microscopis invertits i els microscopis de fluorescència perquè tothom pugui triar.
El microscopi invertit, com un microscopi normal, consta principalment de tres parts: part mecànica, part d'il·luminació i part òptica. La composició d'un microscopi invertit és la mateixa que la d'un microscopi vertical normal, excepte que la lent de l'objectiu i el sistema d'il·luminació estan invertits, amb el primer sota l'escenari i el segon per sobre de l'escenari. Aquesta estructura amplia significativament la distància efectiva entre el sistema de focus d'il·luminació i l'escenari, facilitant la col·locació d'eines d'observació més gruixudes, com ara plats de cultiu i ampolles de cultiu cel·lular (per descomptat, també es poden utilitzar diapositives de vidre), mentre que la distància de treball entre el objectiu i el material no ha de ser molt gran. El microscopi invertit és utilitzat per institucions mèdiques i sanitàries, universitats i instituts de recerca per observar microorganismes, cèl·lules, bacteris, cultius de teixits, suspensions, sediments, etc. Pot observar contínuament el procés de proliferació i divisió cel·lular i bacteriana en medi de cultiu, i pot capturar qualsevol forma d'aquest procés. Àmpliament utilitzat en camps com la citologia, parasitologia, oncologia, immunologia, enginyeria genètica, microbiologia industrial i botànica.
La microscòpia de fluorescència s'utilitza per estudiar l'absorció, el transport, la distribució i la localització de substàncies dins de les cèl·lules. Per a l'objecte provat, hi ha dues maneres de generar fluorescència: la fluorescència espontània, que s'emet directament per la irradiació ultraviolada; La fluorescència secundària es produeix quan l'objecte observat és tractat amb colorants fluorescents i exposat a llum ultraviolada abans d'emetre fluorescència. Algunes substàncies de les cèl·lules, com la clorofil·la, produeixen fluorescència espontània després d'estar exposades a la radiació ultraviolada; Algunes substàncies en si mateixes poden no emetre fluorescència, però si es tenyeixen amb colorants fluorescents o anticossos fluorescents, també poden emetre fluorescència secundària sota radiació ultraviolada. Un microscopi de fluorescència utilitza una font de llum puntual d'alta eficiència lluminosa per emetre una certa longitud d'ona de llum (UV 365nm o UV blau 420nm) a través d'un sistema de filtrat de color com a llum d'excitació, que excita les substàncies fluorescents de la mostra per emetre diversos colors de fluorescència. Després d'això, s'observa mitjançant la ampliació de la lent de l'objectiu i l'ocular. D'aquesta manera, fins i tot amb una fluorescència feble, és fàcilment reconeixible i altament sensible sota fons forts contrastats. S'utilitza principalment per estudiar l'estructura cel·lular, la funció i la composició química.
La microscòpia de fluorescència es pot dividir en dos tipus: tipus de transmissió i tipus caiguda. El primer és més primitiu, mentre que el segon és més avançat. La construcció bàsica dels dos tipus de microscopis de fluorescència és similar, amb la principal diferència que la llum d'excitació transmesa travessa la mostra, produint fluorescència en el seu conjunt. Aleshores, la fluorescència entra a la lent de l'objectiu, i com més gran sigui l'augment, més feble serà la fluorescència; La llum d'excitació que cau es projecta a la superfície de la mostra, produint fluorescència que entra a la lent de l'objectiu. Com més gran sigui l'augment, més forta serà la fluorescència, la qual cosa la fa apta per a l'observació d'alta potència. Els components principals d'un microscopi de fluorescència inclouen una font de llum de llum de mercuri, una placa de filtre d'excitació, un espectrofotòmetre (tipus de gota), una placa de filtre de supressió i un condensador de camp fosc (tipus de transmissió). A més, a causa del fort escalfament de les làmpades de mercuri, la majoria d'elles també estan equipades amb filtres absorbents de calor. Alguns microscopis de fluorescència també tenen un objectiu de contrast de fase i una obertura circular, que permeten l'observació de contrast de fase. Alguns microscopis de fluorescència adopten una estructura invertida, que també és un microscopi invertit, etc.
A més, els microscopis esmentats anteriorment es poden muntar en microscopis digitals mitjançant la instal·lació de CCD, que converteix les imatges físiques vistes pel microscopi en imatges digitals analògiques i les imatges en un ordinador. Com a resultat, podem canviar la nostra investigació en el microcamp de l'observació binocular tradicional a la reproducció mitjançant pantalles, millorant així l'eficiència del treball.
