Principis i característiques estructurals de la microscòpia de fluorescència
La microscòpia de fluorescència és l'ús d'una alta eficiència de luminiscència del punt, mitjançant la filtració del sistema de color per emetre una certa longitud d'ona de llum (com ara 3650 ultraviolats o 4200 blau violeta) com a llum d'excitació, l'excitació de material fluorescent dins de l'exemplar emet una varietat de diferents colors de fluorescència, i després augmenta a través de l'objectiu i els oculars per a l'observació. D'aquesta manera, en el fons de contrast fort, fins i tot si la fluorescència és molt feble, és fàcil d'identificar, alta sensibilitat, s'utilitza principalment per a l'estudi de l'estructura i la funció cel·lular i la composició química. L'estructura bàsica d'un microscopi de fluorescència es compon d'un microscopi òptic ordinari més alguns accessoris (com ara una font de llum de fluorescència, filtres d'excitació, separador de feix bicolor i filtres de bloqueig, etc.). Font de llum fluorescent: generalment s'utilitza làmpada de mercuri d'ultraalta pressió (50-200W), que pot emetre una varietat de longituds d'ona de llum, però cada material fluorescent té una longitud d'ona d'excitació de fluorescència més forta, de manera que cal afegir filtres d'excitació (generalment). filtre d'excitació ultraviolada, violeta, blau i verd), de manera que només una certa longitud d'ona de la llum d'excitació a través de la irradiació de mostres, mentre que l'altra llum s'absorbeix. Per tant, cal afegir un filtre d'excitació (generalment filtres d'excitació ultraviolat, violeta, blau i verd), de manera que només una certa longitud d'ona de llum d'excitació a través de l'exemplar, mentre que una altra llum s'absorbeix. Quan cada substància s'irradia amb llum d'excitació, emet una fluorescència visible d'una longitud d'ona més gran que la de la llum irradiada en molt poc temps. La fluorescència té una especificitat, generalment més feble que la llum d'excitació, per poder observar la fluorescència específica, cal seleccionar la lent objectiu darrere de la necessitat d'afegir bloqueig (o supressió) per utilitzar-la.
Diferència entre microscopi de fluorescència i microscopi normal
1. El mètode d'il·luminació sol ser caiguda, és a dir, la font de llum es projecta sobre la mostra a través de la lent de l'objectiu;
2. La font de llum és llum ultraviolada, amb una longitud d'ona més curta i un poder de resolució més alt que els microscopis normals;
3. Hi ha dos filtres especials, el de davant de la font de llum s'utilitza per filtrar la llum visible, i el que hi ha entre l'ocular i la lent de l'objectiu s'utilitza per filtrar la llum ultraviolada per protegir l'ull humà.
El microscopi de fluorescència també és una mena de microscopi òptic, la principal diferència és que la longitud d'ona d'excitació dels dos és diferent. Això determina l'estructura del microscopi de fluorescència i el microscopi òptic ordinari i l'ús de diferents mètodes.
El microscopi de fluorescència és l'eina bàsica per a la citoquímica d'immunofluorescència. Es compon de font de llum, sistema de placa de filtre i sistema òptic i altres components principals. Utilitza una certa longitud d'ona de llum per estimular l'exemplar a emetre fluorescència, que s'amplia a través de la lent objectiu i el sistema d'oculars per observar la imatge de fluorescència de la mostra.
