Procediment experimental per al mètode de recompte per microscòpia microbiològica directa
1. Dilució
Suspensió de Saccharomyces cerevisiae per a una dilució adequada, el líquid bacterià, com ara no gruixut, no es pot diluir.
2. Inspecció del mirall de la cambra de recompte
Abans d'afegir mostres, primer s'ha d'inspeccionar la cambra de recompte de la placa de recompte. Si hi ha brutícia, cal netejar-la abans de comptar.
3. Addició de la mostra
La placa d'hematocrit neta i seca coberta amb un cobreobjectes, i després la bureta asèptica de boca fina es dilueix el líquid de llevat de cervesa des de la vora del cobreobjectes (no hauria de ser massa), de manera que el líquid bacterià al llarg de la bretxa per infiltració capil·lar la cambra de recompte, la cambra de recompte general es pot omplir de líquid bacterià. Tingueu en compte que no hi hauria d'haver bombolles d'aire.
4. Recompte al microscopi
Després de descansar durant 5 minuts, col·loqueu la placa de recompte de sang a l'etapa del portador del microscopi, primer trobeu la ubicació de la cambra de recompte amb una ampliació baixa i, a continuació, canvieu a una ampliació alta per comptar. Si es troba que el líquid bacterià és massa espès o massa prim abans de comptar, la dilució s'ha de reajustar abans de comptar. En general, la dilució de la mostra requereix uns 5-10 organismes a cada cèl·lula petita. Per a cada cambra de recompte, es compten els organismes dels 5 compartiments centrals (es poden seleccionar 4 cantonades i el centre del compartiment central). Els bacteris situats a les línies de la quadrícula generalment només es compten a les línies superior i dreta. En el cas de la brotació del llevat, es compten dos organismes si el cos de brot és la meitat de la mida de la cèl·lula mare. Recompte d'una mostra de les dues cambres de recompte per comptar el valor per calcular el contingut bacterià de la mostra.
5. Neteja de la placa d'hematocrit
Després de l'ús, la placa de recompte de cèl·lules sanguínies a la gàbia d'aigua amb una columna d'aigua esbandida, no utilitzeu objectes durs per rentar i raspallar, rentar i assecar o assecar amb un assecador de cabells. Inspeccioneu la placa microscòpicament i observeu si hi ha organismes residuals o altres precipitats a cada petit compartiment. Si no està net, s'ha de repetir el rentat fins que estigui net.
