Principis experimentals del mètode de recompte directe de microscòpia microbiana
El recompte directe sota un microscopi mitjançant un hemocitòmetre és un mètode d'ús habitual per comptar microorganismes. L'avantatge d'aquest mètode és que és intuïtiu i ràpid. Col·loqueu la suspensió bacteriana (o suspensió d'espores) adequadament diluïda a la cambra de recompte entre el portaobjectes i el cobreobjectes de l'hemocitòmetre i comptar amb un microscopi. Com que el volum de la cambra de recompte és fix (0,1 mm2), es pot convertir en el nombre total de microorganismes per unitat de volum en funció del nombre de microorganismes observats al microscopi. Com que aquest mètode compta el nombre total de bacteris vius i morts, també s'anomena mètode de recompte total de bacteris.
Un hemocitòmetre sol ser una diapositiva especial amb quatre ranures que formen tres plataformes. La plataforma del mig està dividida en dues meitats per un solc horitzontal curt. Hi ha una quadrícula quadrada gravada a la plataforma a cada costat. Cada graella quadrada es divideix en nou quadrats grans. La gran plaça del mig és la sala de recompte. El recompte de microorganismes es fa a la cambra de recompte. L'estructura de l'hemocitòmetre es mostra a la figura Ⅷ-1.
L'escala de la cambra de recompte té generalment dues especificacions. Un és un quadrat gran dividit en 16 quadrats mitjans, i cada quadrat mitjà està dividit en 25 quadrats petits (figura Ⅷ-2); l'altre és un gran quadrat. La graella quadrada es divideix en 25 quadrats mitjans i cada quadrat mitjà es divideix en 16 quadrats petits (figura VIII-1, C). Però independentment del tipus de tauler de recompte que sigui, el nombre de quadrats petits a cada quadrat gran és el mateix, és a dir, 16×25=400 quadrats petits, tal com es mostra a la figura Ⅷ-2.
La longitud lateral de cada quadrat gran és d'1 mm, de manera que l'àrea de cada quadrat gran és d'1 mm2. Després de cobrir la coberta de vidre, l'alçada entre la diapositiva i la coberta és de 0,1 mm, de manera que el volum de la cambra de comptatge és de 0,1 mm3.
Quan feu el recompte, normalment compta el nombre total de bacteris en cinc quadrats mitjans, després trobeu el valor mitjà de cada quadrat mitjà i, a continuació, multipliqueu per 16 o 25 per obtenir el nombre total de bacteris en un quadrat gran i, a continuació, calculeu Convertir al quadrat. nombre total de bacteris en 1 ml de solució bacteriana.
