Microscòpia biològica del volum de blocs de teixit
Biomicroscòpia Fins ara, la fixació gelada, les seccions ultrafines congelades i la manipulació en sec congelat són mètodes habituals per als microcamps de raigs X de teixits i cèl·lules. Els detalls del mètode s'expliquen en els punts següents:
Microscopis biològics Els microscopis amb una lent de condensador es poden moure cap amunt i cap avall per aconseguir una brillantor moderada, o es pot canviar l'obertura de l'expansor de llum variable per aconseguir una brillantor moderada de 9b. Si la llum és assolellada, el telescopi es pot elevar adequadament i l'obertura de la llum variable es pot ampliar adequadament. Si la llum és massa forta, llavors el mirall del focus pot ser adequat cap avall, l'obertura del salt de llum variable per a una reducció adequada. Si en aquest cas encara se sent encegador, podeu triar el filtre adequat col·locat al suport sota el focus. Això es pot obtenir per fer-vos satisfet amb la brillantor. Per descomptat, en l'ajust de les posicions superior i inferior de la lent del condensador es pot variar la mida de l'obertura de la lectura de llum i la selecció de filtres adequats, és a dir, després d'un cert període de pràctica i experiència.
Microscopi biològic Un tema molt important és en el procés de mostreig i separació de cèl·lules, liofilització i incrustació de resina (FD) després de la congelació de fullets ultra, la liofilització després de l'execució fina de cada part del contingut de la composició elemental 65 ha de ser manipulat amb molta cura, i no ha de danyar les cèl·lules que s'han d'observar i analitzar. Com que l'anàlisi de microàrees de raigs X no és només un munt de passos, i el cost és molt elevat, si després de molt de temps i múltiples passos de processament, les cèl·lules analitzades són cèl·lules danyades o cèl·lules mortes, per treure conclusions equivocades. és molt lamentable. Per exemple, els cardiomiòcits aïllats pel tractament amb col·lagenasa tenen dues morfologies, una té forma de vareta llarga i l'altra és rodona. Aquestes últimes són cèl·lules moribundes que van ser danyades durant l'aïllament cel·lular.
Biomicroscòpia El contingut i la distribució dels electròlits en aquests dos tipus de cèl·lules són molt diferents. Na era molt alt i K molt baix als cardiomiòcits rodons, i la concentració de ca era molt alta als mitocondris. Després de comprovar amb altres mètodes analítics, es va demostrar que l'alt Na i el baix K a les cèl·lules rodones i l'alt ca en els mitocondris eren el resultat del dany a la membrana cel·lular durant la separació cel·lular. La fixació en fred de cèl·lules i teixits sovint es fa mitjançant la fixació d'extinció seguida de la conservació en nitrogen líquid. La fixació d'extinció és important per a l'eficàcia de la conservació. Les cèl·lules vives o els teixits frescos són rics en aigua, quan l'extinció és sovint les cèl·lules o teixits i l'agent fred (especialment amb nitrogen líquid pur fred) en contacte directe amb les parts de la primera congelació-fixació, formant així una "closca", que impedeix la fixació en fred del centre de la cèl·lula. Com a resultat, els cristalls de gel es troben sovint al centre de cèl·lules més grans durant l'anàlisi microcel·lular de raigs X. Per evitar que això passi, s'utilitzen com a refrigerants substàncies amb un punt de fusió superior al nitrogen líquid però inferior a 806c sec. Hi ha moltes substàncies d'aquest tipus, però * fàcil d'obtenir, barat és el propà concentrat (punt d'ebullició de 42.120c, punt de fusió de 187.10c, pes molecular de 44.1), la velocitat de refredament * ràpida. No obstant això, té l'inconvenient de ser inflamable.
El microscopi biològic es pot col·locar en una fibra muscular de prestatge especial, de manera que cal arreglar la contracció de la fibra muscular per assolir una determinada fase de temps, inicieu immediatament el broquet, de manera que el propà líquid al raig de fibra muscular, de manera que l'extinció de el fred arreglat. A continuació, es treu la fibra muscular juntament amb el bastidor i es posa en nitrogen líquid. Si es fixen cèl·lules sanguínies o cèl·lules aïllades, primer centrifugació a baixa velocitat per concentrar les cèl·lules, les cèl·lules es transferiran a una bona conductivitat tèrmica del tub de plata, el tub a la carcassa de propà líquid es fixarà en fred. Sala de laboratori fixa el pàncrees de rata, les dues primeres peces d'acer amb heli líquid (o nitrogen líquid) prerefrigerat, amb una pinça fixada les dues peces de coure es col·locaran davant i darrere del pàncrees, de manera que la tia del fixació en fred que extingui la glàndula. Els teixits o les cèl·lules es poden emmagatzemar en nitrogen líquid durant molt de temps després de la seva extinció i fixació.
