Avantatges i desavantatges de la microscòpia d'escaneig làser multiphoton
Els avantatges són els següents:
1. Entusiasmada per la llum vermella o infraroja, la dispersió de la llum és petita (la dispersió de partícules petites és inversament proporcional a la quarta potència de la longitud d’ona).
2. No cal fer forats, capaços de recollir fotons més dispersos de la secció transversal de la imatge.
3. Els forats no poden distingir fotons dispersos emesos de zones defocades o focals, i els multiphotons tenen una millor relació senyal-soroll en imatges profundes.
5. La llum ultraviolada o visible que s’utilitza per a l’excitació de fotons d’un sol fotó s’absorbeix fàcilment i s’atén per la mostra abans que el feix arribi al pla focal, cosa que dificulta la il·lusió de capes profundes.
5. En termes d’observació de microscòpia biològica, la primera consideració és no danyar l’estat actiu de l’organisme en si i mantenir la circulació d’aigua, concentració d’ions, oxigen i nutrients. En el camp de l’observació de la llum, l’energia tèrmica i del fotó ha de romandre dins de la dosi d’irradiació i l’energia lleugera que no danyen les cèl·lules.
6. La microscòpia multiphoton també té molts avantatges. En termes de resolució tridimensional, invasió de profunditat, eficiència de dispersió, llum de fons, relació senyal-soroll, control, etc., els microscopis làser tenen característiques inigualables o superiors que els microscopis làser anteriors no posseïen.
Multiphoton confocal laser scanning microscopy has been extended to various research and application fields, It can perform three-dimensional non-destructive observation on samples in their natural state and improve the resolution and signal-to-noise ratio of the system By utilizing the changes in material properties after multiphoton excitation, three-dimensional height data storage and three-dimensional microfabrication in any direction can also be achieved, que té un valor d’aplicació elevat, es pot creure que, amb el desenvolupament posterior de tecnologies mecàniques, materials i làser relacionades amb la microscòpia confocal multiphoton, la microscòpia d’escaneig de làser confocal multiphoton tindrà un major desenvolupament i aplicacions més àmplies
Els desavantatges són els següents:
1. Només per a la imatge de fluorescència.
2. Si la mostra inclou cromòfors que poden absorbir llum d’excitació, com ara pigments, la mostra pot ser sotmesa a danys tèrmics.
3. La resolució es redueix lleugerament, tot i que es pot millorar mitjançant la utilització simultàniament forats petits confocals, hi haurà pèrdua de senyal.
4. A causa de les limitacions de làsers ultrafastos costosos, el cost dels microscopis d’escaneig multifotó és relativament elevat.
